胰島素干預對糖尿病鼠骨折愈合過程中PDGF表達影響的實驗研究.pdf

1、背景
　　 多年來，國內外學者借助組織化學、組織學、組織形態(tài)計量學、生物力學等手段對骨折愈合進行了大量的實驗研究，發(fā)現(xiàn)血小板衍生生長因子（Platelet-derived growth factor，PDGF）在骨折愈合過程中發(fā)揮著重要的作用。糖尿病對骨折愈合的影響已經(jīng)有許多組織形態(tài)學、細胞生物學研究，揭示了許多細胞因子在糖尿病大鼠骨折愈合過程中的作用。其中也包括PDGF在細胞內的表達。但是胰島素干預究竟對糖尿病大鼠骨折愈合過程

2、中PDGF產(chǎn)生什么影響尚無系統(tǒng)化的研究。
　　 目的
　　 （1）探討糖尿病大鼠骨痂組織內PDGF的表達水平。
　　 （2）探討糖尿病大鼠骨折愈合能力的降低是否與PDGF的表達異常有關。
　　 （3）探討胰島素干預治療后骨折愈合的改善情況及PDGF的表達的變化。
　　 方法：
　　 將55只雄性Wister大鼠適應性喂養(yǎng)3天，隨機分為糖尿病組（40只）和對照組（15只）。糖尿病模型采用生理

3、鹽水配制的四氧嘧啶，從大鼠腹腔注入，破壞胰島細胞誘導糖尿病。共成功制作糖尿病模型36只。
　　 上述糖尿病大鼠成功模型36只和對照組15只大鼠，在無菌條件下，顯露右脛骨，線鋸鋸斷脛骨平臺下約0.7cm，給予直徑1mm克氏針髓內固定術，術后縫合、簡單包扎。
　　 糖尿病組再隨機分為兩組：胰島素治療組（18只）和非胰島素治療組（18只），三組動物分籠飼養(yǎng)。術后1天治療組開始腹部皮下胰島素注射，每同一次，其余兩組注射等量生理鹽

4、水。術后每周測動物模型的空腹血糖、尿糖及尿酮。手術后3天、1、2、4、6周，每組隨機抽取3只大鼠，抽取空腹血測量血糖，拍攝右脛骨正側位X線片，然后斷頸法處死，取脛腓骨全長，剔除軟組織，生理鹽水沖洗干凈，切取骨折部位，脫鈣、HE染色，免疫組化檢測，光鏡下觀察。
　　 所有定量數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標準差（（）±S）表示，SPSS13.0統(tǒng)計軟件分析，糖尿病組與對照組各項指標采用組間兩獨立樣本t檢驗；定性數(shù)據(jù)進行卡方檢驗，按照檢驗水準α=0

5、.05，P<0.05作為有顯著性差異的檢驗標準。
　　 結果：
　　 （1）X線結果：在各時間點上，非胰島素治療組的骨痂形成比對照組及胰島素治療組均減少。
　　 （2）組織化學染色顯色：各時間點的大鼠骨折處骨痂細胞，對照組及胰島素治療組明顯多于非胰島素治療組。
　　 （3）免疫組化：各時間點的PDGF-AA，PDGF-BB在骨痂及骨膜內的表達，非胰島素治療組明顯低于對照組和胰島素治療組。而對照組與胰島素治

6、療組的表達無明顯區(qū)別。
　　 結論：
　　 1.糖尿病使大鼠骨折后骨痂組織生長及骨痂內PDGF-AA.、PDGF-BB生成量減少，是糖尿病大鼠骨折愈合差的一個重要原因。
　　 2.PDGF-AA、PDGF-BB在大鼠骨折處骨膜內的表達，說明PGDF對骨折愈合有一定的促進作用。
　　 3.胰島素治療后可顯著增加糖尿病大鼠骨折局部PDGF-AA、PDGF-BB的表達。
　　 4.胰島素治療可增加骨折局