胰島素治療對糖尿病大鼠骨折愈合及VEGF表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的： （1）探討糖尿病對大鼠骨折愈合過程的影響及應(yīng)用胰島素干預(yù)治療后的改變； （2）應(yīng)用糖尿病合并骨折的大鼠動(dòng)物模型，從分子、細(xì)胞水平上探討糖尿病和胰島素干預(yù)治療對糖尿病大鼠骨折愈合的作用機(jī)制。 方法： 選取雄性Wister大鼠198只，隨機(jī)分為三組：第一組：糖尿病胰島素治療組（n=66）；第二組：糖尿病組（n=66）；第三組：非糖尿病對照組（n=66）。前兩組腹腔注射四氧嘧啶建立糖尿病動(dòng)物模型，對照組

2、腹腔注射等量的生理鹽水。建立糖尿病動(dòng)物模型后，在各組大鼠脛骨中點(diǎn)處用手術(shù)方法制成標(biāo)準(zhǔn)骨折模型。術(shù)后1周、2周、4周、6周、8周分別進(jìn)行X線檢查，并在3天、1周、2周、4周、6周、8周各時(shí)間點(diǎn)每組分別隨機(jī)抽取4只大鼠處死，取出骨標(biāo)本，脫鈣后制成石蠟切片，進(jìn)行組織染色和免疫組化檢測，光鏡下觀察VEGF在不同時(shí)期的表達(dá)強(qiáng)度。并于術(shù)后4周、6周、8周每組留取7只大鼠雙側(cè)脛骨標(biāo)本，冷凍保存?zhèn)浼羞M(jìn)行生物力學(xué)檢測。 結(jié)果： 1．X線

3、結(jié)果：糖尿病組骨痂形成各時(shí)間點(diǎn)均明顯低于對照組和胰島素治療組，而后兩組之間比較均無明顯差別。 2．生物力學(xué)測定：術(shù)后4周、6周、8周糖尿病組骨折處骨痂的機(jī)械強(qiáng)度均明顯低于對照組和糖尿病胰島素治療組，而后兩組之間比較均無明顯差別。 3．組織學(xué)染色顯示：術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)糖尿病組較對照組和胰島素治療組大鼠骨折處骨痂軟骨細(xì)胞肥大并且成熟延遲。 4．免疫組化檢測：骨折后1-4周VEGF在骨痂和骨膜的細(xì)胞內(nèi)廣泛表達(dá)，而在糖尿病組