慢性脊髓損傷SEP與病理相關(guān)性研究.pdf

1、目的：通過椎管內(nèi)放置聚氨酯壓塊建立慢性脊髓壓迫模型，探討SEP在該模型相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)與病理變化相關(guān)性。
　　方法：取健康成年雄性SD大鼠96只，依次編號(hào)，隨機(jī)將其分為實(shí)驗(yàn)組（n=48）與對(duì)照組（I組，n=48），其中實(shí)驗(yàn)組大鼠行頸6節(jié)段椎板切除，暴露脊髓，并將可膨脹高分子材料放置于頸5節(jié)段椎管內(nèi)左后方側(cè)，建立慢性脊髓壓迫模型；對(duì)照組中大鼠僅切除頸6節(jié)段椎板。在成功建立模型后第1天、2天、3天、7天、10天、14天、21天、28天，分別

2、記錄相應(yīng)時(shí)間節(jié)點(diǎn)大鼠的BBB評(píng)分、SEP信號(hào)及脊髓損傷病理變化，并分別記錄為A組、B組、C組、D組、E組、F組、G組、H組，將對(duì)照組設(shè)為I組。觀察并記錄實(shí)驗(yàn)組大鼠BBB評(píng)分，將SEP信號(hào)進(jìn)行處理分析得出數(shù)據(jù),通過HE染色觀察受壓脊髓組織病理變化情況，采用TUNEL染色檢測(cè)損傷脊髓組織中細(xì)胞凋亡情況，并觀察細(xì)胞凋亡與壓迫時(shí)間的關(guān)系,最后通過免疫組化檢測(cè)GFAP蛋白在壓迫脊髓節(jié)段中的表達(dá)。
　　結(jié)果：⑴BBB評(píng)分：大鼠建模后至術(shù)后第3

3、天期間，單側(cè)（左）前肢活動(dòng)嚴(yán)重受限，步態(tài)異常，術(shù)后第3天（C組）BBB評(píng)分最低，術(shù)后第3天組（C組）與7天組（D組）存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，隨后實(shí)驗(yàn)組（A-H組）中大鼠評(píng)分逐漸增高，術(shù)后10天（E組）進(jìn)入平臺(tái)期時(shí)，行為學(xué)評(píng)分接近對(duì)照組（I組），但差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；⑵SEP信號(hào)：實(shí)驗(yàn)組（A-H組）中大鼠SEP均可觀察到不同程度的信號(hào)波幅值降低、潛伏期延長(zhǎng)，其中術(shù)后14天組（F組）尤為顯著,與E組、G組及I組比較存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，隨著壓迫時(shí)間延長(zhǎng)SE

4、P信號(hào)曲線幅值升高，潛伏期縮短，波形逐漸穩(wěn)定，進(jìn)入平臺(tái)期，但未能恢復(fù)至正常形態(tài)；⑶HE染色：所有實(shí)驗(yàn)組顯微鏡下可見脊髓受壓處白質(zhì)疏松，出現(xiàn)疏網(wǎng)狀改變，部分可見脫髓鞘改變；神經(jīng)細(xì)胞受壓水腫；所有實(shí)驗(yàn)組中標(biāo)本均可見到不同程度的神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目減少，還可觀察到膠質(zhì)細(xì)胞出現(xiàn)不同程度腫大，小膠質(zhì)細(xì)胞大量增生并包繞神經(jīng)細(xì)胞的現(xiàn)象，其中術(shù)后1、2、3天組（A-C組）脊髓標(biāo)本中可見明顯脊髓水腫、液化，術(shù)后7天組中可見脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元細(xì)胞出血壞死，數(shù)量減少

5、，大量空泡形成；⑷TUNEL染色：觀察到大鼠術(shù)后實(shí)驗(yàn)組中凋亡神經(jīng)元陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)逐漸增多，于術(shù)后14天（F組）達(dá)到峰值，并穩(wěn)定在該水平，其與術(shù)后7天組（D組）存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，與術(shù)后21天組（G組）及28天組（H組）計(jì)數(shù)無明顯差別；⑸免疫組織化學(xué)：實(shí)驗(yàn)組術(shù)后膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量明顯增多，其特征表現(xiàn)為GFAP染色陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量增加及形態(tài)學(xué)變化，GFAP細(xì)胞計(jì)數(shù)達(dá)到峰值，與術(shù)后14天組（F組）及對(duì)照組（I組）存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），與術(shù)后28天組

6、（H組）比較無明顯差別。
　　結(jié)論：通過實(shí)驗(yàn)證明，BBB評(píng)分：大鼠慢性脊髓損傷模型建立術(shù)后3天內(nèi)評(píng)分降低顯著，是聚氨酯壓塊快速膨脹壓迫脊髓，出現(xiàn)脊髓組織水腫。從術(shù)后10天開始，BBB評(píng)分進(jìn)入穩(wěn)定期。SEP是有效評(píng)估慢性脊髓損傷的敏感方法，A-F組中大鼠SEP信號(hào)波幅逐漸降低，潛伏期逐漸延長(zhǎng)，F(xiàn)組信號(hào)提示脊髓損傷最嚴(yán)重，隨后逐漸恢復(fù)，術(shù)后21日進(jìn)入平臺(tái)期，但未能恢復(fù)正常；HE染色：在建立模型后脊髓組織至術(shù)后14日病變最重，隨后細(xì)胞形