胃樂膠囊抗慢性胃潰瘍藥效及遺傳毒性研究.pdf

1、目的:研究胃樂膠囊對醋酸所致慢性胃潰瘍大鼠的作用和機制，采用最大給藥量試驗，細菌回復(fù)突變試驗，微核試驗，精子畸形試驗研究胃樂膠囊潛在的急性毒性和遺傳毒性。
　　方法:胃樂膠囊對醋酸所致慢性胃潰瘍大鼠的影響試驗，取60只SD雄性大鼠，適應(yīng)性飼養(yǎng)5天后，隨機分為6組，每組10只。手術(shù)前禁食不禁水14～16小時后，假手術(shù)組大鼠在胃漿膜下層注射0.9％生理鹽水(0.1mL/只)，其它大鼠在胃漿膜下層注射20％醋酸（0.1mL/只）。造模后

2、第一天，按10mL/kg灌胃給藥，給藥10天，每天1次，假手術(shù)組和模型組(0.5％CMC)，OMRZ組（奧美拉唑，4.2mg/kg），胃樂膠囊低、中、高劑量組劑量分別為189、378、756mg/kg。第10天藥后1小時，采集血樣和剖檢胃。采用ELISA法檢測血清和胃組織的前列腺素E2(PGE2)含量和胃組織的表皮生長因子(EGF)含量，采用生化檢測分析血清和胃組織的超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量，胃組織病理采用HE染色

3、，使用光鏡檢查。
　　急性毒性試驗，選用SPF級KM小鼠40只，雌雄各半，適應(yīng)性飼養(yǎng)3天后，隨機分為2組:胃樂膠囊給藥組（84g/kg）和溶媒對照組(0.5％CMC)，每組20只，雌雄各半。禁食不禁水14～16小時后，按40mL/kg灌胃，胃樂膠囊最大體積40mL/kg給藥，溶媒對照組給予等體積給藥0.5％CMC。24小時內(nèi)給藥3次，間隔4～5小時，藥后觀察14天，記錄急性中毒反應(yīng)和死亡情況。
　　細菌回復(fù)突變試驗，采用菌株

4、TA97、TA98、TA100、TA102及TA1535作為實驗系統(tǒng)。在±S9mix條件下，將5種菌株制成懸液，胃樂膠囊的暴露量為5000、1000、200、40、8μg/皿，同時設(shè)溶媒對照組和陽性組。每菌株每劑量平行做3皿，試驗重復(fù)1次。記錄在37℃生化培養(yǎng)箱中孵育48小時每皿菌落數(shù)。
　　骨髓微核試驗，選用SPF級雄性KM小鼠30只，適應(yīng)性飼養(yǎng)3天后，隨機分為5組，每組6只。禁食不禁水14～16小時后，溶媒對照組(0.5％CM

5、C)，環(huán)磷酰胺組(40mg/kg)，胃樂膠囊低、中、高劑量組劑量分別為3500、7000、14000mg/kg。按20mL/kg灌胃，采用單次給藥，藥后24h、48h進行骨髓采樣。檢測各組骨髓嗜多染紅細胞和總紅細胞的比例（PCE比例）以及嗜多染紅細胞微核率(MNPCE比率)。
　　精子畸形試驗，選用SPF級雄性KM小鼠25只，適應(yīng)性飼養(yǎng)3天后，隨機分為5組，每組5只。禁食不禁水14～16小時后，溶媒對照組(0.5％CMC)，環(huán)磷酰

6、胺組(40mg/kg)，胃樂膠囊低、中、高劑量組劑量分別為3500、7000、14000mg/kg。按20mL/kg灌胃，每天1次，連續(xù)給藥5天。首次給藥后第35天取精液涂片，檢測各組精子畸形數(shù)、精子類型和精子畸形率。
　　結(jié)果:胃樂膠囊對醋酸所致慢性胃潰瘍大鼠的影響試驗，給藥10天后，與模型組比較。①體重顯著性增加(P＜0.05）;②胃潰瘍指數(shù)和胃潰瘍分數(shù)顯著降低(P＜0.05)，胃潰瘍抑制率為22.38％，30.23％，41.

7、86％;③血清和胃組織PGE2含量，胃組織EGF含量顯著增加(P＜0.05）;④血清SOD顯著增加(P＜0.05），胃組織SOD增加，血清和胃組織MDA降低，但不具有統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05）;⑤胃潰瘍病理損傷明顯改善，胃漿膜下層炎癥與水腫明顯緩解。
　　急性毒性試驗，結(jié)果顯示，未發(fā)現(xiàn)胃樂膠囊有明顯毒性反應(yīng)和副作用，對體重?zé)o明顯影響(P＞0.05），臨床癥狀觀察未發(fā)現(xiàn)震顫、抽搐、腺體異常分泌、腹瀉、精神萎靡、嗜睡、昏迷等癥狀，解剖

8、后肉眼觀察未見組織器官體積、顏色、質(zhì)地等改變。
　　細菌回變突變試驗，在±S9mix條件下，與溶媒對照組比較，結(jié)果顯示，WL5個劑量組菌株TA97、TA98、TA100、TA102和TA1535回變菌落數(shù)均未超過溶媒對照組回變菌落數(shù)的2倍，菌落數(shù)比較無顯著性差異(P＞0.05)。而陽性組各劑量組回變菌落數(shù)均遠超過溶媒對照組2倍以上，菌落數(shù)顯著性增加(P＜0.05）。
　　骨髓微核試驗，與溶媒對照組比較，各劑量組在24h和48

9、h2個采樣點微核率未見明顯差異(P＞0.05），范圍在1.3‰～4.0‰之間。但環(huán)磷酰胺組在24h和48h2個采樣點微核率均顯著升高(P＜0.05），微核率分別為29.5‰、23.2‰。
　　精子畸形試驗，與溶媒對照組比較，各劑量組的小鼠精子畸形率未見明顯差異(P＞0.05），精子畸形率在14.6‰～16.6‰之間，主要的精子畸形類型為無鉤、無定形、胖頭、香蕉頭、尾折疊，但未觀察到胃樂膠囊有導(dǎo)致特定類型精子畸形率升高(P＞0.05