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文檔簡介
1、本文采用體外急性暴露法,從生化水平上,研究了鎘( Cd2+)對背角無齒蚌(Anodonta woodiana woodiana)鰓、消化腺、內臟團和外套膜四個重要組織器官的免疫毒性影響。實驗設置5個Cd2+濃度處理組(4.22 mg/L、8.43 mg/L、16.82 mg/L、33.72 mg/L和67.45 mg/L)及一個空白對照組,處理時間分別為24 h、48 h、72 h和96 h。體外急性鎘暴露處理后測定四個組織器官中的酸性
2、磷酸酶(ACP)、堿性磷酸酶(AKP)和溶菌酶(LSZ)活力三個免疫指標。通過透射電子顯微鏡,從細胞水平上觀察了16.82 mg/L和67.45 mg/L Cd2+濃度處理96 h后,其對背角無齒蚌消化腺組織細胞超微結構的影響。實驗結果顯示:
(1)Cd2+對ACP的活性影響存在組織差異性,在鰓中表現出先抑制,72 h后出現誘導的變化趨勢;消化腺組織中ACP活性在Cd2+暴露24 h時并未發(fā)生顯著變化,48 h開始表現為顯著(
3、P<0.01)的激活作用,并表現出劑量-效應關系。AKP的活性在兩種組織、四個處理時間內均表現出“抑制-誘導-抑制”的變化趨勢,但在各組織、各濃度中酶活性變化的規(guī)律性較差。LSZ的活性在鰓中呈現低濃度和中濃度組顯著(P<0.05)被誘導,而高濃度組LSZ活性在24 h出現顯著誘導(P<0.05)后,隨Cd2+暴露時間的延長而逐漸抑制;在消化腺組織中,Cd2+處理24 h時,除16.82 mg/L組LSZ活性顯著升高(P<0.05)外,其
4、余處理組較對照組均未出現明顯變化;隨著Cd2+處理時間的繼續(xù)延長,所有濃度組LSZ活性均被顯著抑制(P<0.01)。
(2)鎘脅迫對背角無齒蚌內臟團和外套膜組織中的磷酸酶、溶菌酶的活性影響存在組織差異性和較為明顯的濃度效應。其中,ACP活性在內臟團組織中呈現先升高后降低的變化趨勢,各處理組ACP活性較對照組差異顯著(P<0.05)或極顯著(P<0.01),外套膜中的ACP活性持續(xù)被抑制;AKP活性在內臟團和外套膜組織中均呈現“
5、抑制-誘導-抑制”的變化,但不同濃度間的AKP活性變化差異大且無規(guī)律性,推測原因是AKP的底物專一性較差,影響其活性變化的因素并不只有Cd2+;而LSZ活性在內臟團組織當中則表現為中、高濃度持續(xù)抑制,但在外套膜組織當中則呈現先升高后降低的變化趨勢,出現組織差異性。
(3)經Cd2+處理后,背角無齒蚌消化腺細胞在中濃度組(16.82 mg/L)出現了代償反應,細胞中線粒體數目和線粒體內嵴的數目明顯增多,但部分線粒體已出現輕微損傷
6、;高濃度組(67.45 mg/L)的細胞中,線粒體出現了腫脹,基質電子密度降低,嵴排列混亂,雙層膜結構模糊,部分線粒體發(fā)生破裂;細胞當中次級溶酶體增多,細胞內空泡增多等現象。
結論:
(1)鎘對背角無齒蚌各組織的免疫毒性存在組織差異性,從免疫指標的變化趨勢來看,各組織免疫能力的強弱依次為:消化腺>鰓>外套膜>內臟團。
(2)在選擇測定的三個免疫指標當中,由于AKP的活性變化并不只受到Cd2+這單一因素的影響
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