血府逐瘀湯對高尿酸血癥大鼠腎小管上皮細胞OAT3和URAT1作用的研究.pdf

1、[目的]
　　 通過觀察血府逐瘀湯對高尿酸血癥大鼠腎小管上皮細胞OAT3和URAT1的影響，初步探討血府逐瘀湯促進腎臟尿酸排泄的機制，為臨床應用提供依據(jù)。
　　 [方法]
　　 選用清潔級雄性Sprague-Dauley大鼠50只，體重200±10g，隨機分為五組:正常組、模型組、血府逐瘀湯低劑量組、中劑量組和高劑量組，每組10只。正常組以蒸餾水灌胃;模型組、血府逐瘀湯低、中、高各組上午按腺嘌呤(100mg/kg

2、)+鹽酸乙胺丁醇（250mg/kg）灌胃，下午模型組給予蒸餾水灌胃，血府逐瘀湯低、中、高組以不同劑量（0.31g/kg、0.62g/kg、1.24g/kg）的血府逐瘀湯灌胃，所有動物給藥體積為10ml/kg。連續(xù)灌胃2周后，腹腔注射烏拉坦以麻醉，腹主動脈采血，取左腎。檢測各組大鼠血清UA、Scr、BUN的含量;采用光鏡技術(shù)觀察腎組織病理形態(tài)改變;免疫組織化學法檢測大鼠腎小管上皮細胞OAT3和URAT1蛋白的表達水平;實時熒光定量PCR法

3、檢測OAT3-mRNA和URAT1-mRNA的表達量。
　　 [結(jié)果]
　　 1.血清生化指標檢測顯示:模型組、血府逐瘀湯各組UA、Scr、BUN水平高于正常組（P＜0.05或P＜0.01）;血府逐瘀湯中、高劑量組UA、Scr、BUN低于模型組(P＜0.05或P＜0.01)。
　　 2.腎組織病理形態(tài)學改變:模型組大鼠腎組織大量腎小管擴張，管腔內(nèi)可見尿酸結(jié)晶，腎間質(zhì)有大量炎細胞浸潤，近曲小管上皮細胞變性、壞死;血

4、府逐瘀湯高、中劑量組腎小管無明顯擴張，管腔內(nèi)偶見尿酸結(jié)晶，腎間質(zhì)有少量炎細胞浸潤。
　　 3.免疫組化檢測顯示:模型組、血府逐瘀湯各組OAT3陽性目標總面積和IOD值低于正常組（P＜0.05或P＜0.01），中、高劑量組OAT3陽性目標總面積和IOD值高于模型組（P＜0.05或P＜0.01）;模型組、血府逐瘀湯各組URAT1陽性目標總面積和IOD值明顯高于正常組（P＜0.05或P＜0.01），血府逐瘀湯中、高劑量組的URAT1陽

5、性目標總面積和IOD值均低于模型組（P＜0.05或P＜0.01）。
　　 4.Real-Time PCR檢測顯示:模型組、血府逐瘀湯各組OAT3-mRNA相對表達量明顯低于正常組（2-ΔΔCt＜0.5），血府逐瘀湯中、高劑量組OAT3-mRNA相對表達量高于模型組(2-ΔΔCt＞2)。模型組URAT1-mRNA相對表達量明顯高于正常組(2-ΔΔCt＞2)，血府逐瘀湯中、高劑量組URAT1-mRNA相對表達量低于模型組(2-ΔΔC