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文檔簡介
1、目的:通過暴露氣管法給大鼠注射二氧化硅懸液,然后腹腔給藥,注射?;撬幔^察大鼠肺組織中腫瘤壞死因子(TNF-α)表達(dá)的變化以及?;撬釋Ψ卫w維化的影響。
方法:購買SD大鼠60只,隨機的分為60d對照組、模型組、牛磺酸組和90d對照組、模型組、牛磺酸組。先適應(yīng)性飼養(yǎng)一周,一周以后進(jìn)行造模,牛磺酸組與模型組采用暴露氣管法每只大鼠氣管注射1ml的二氧化硅混懸液,對照組氣管注射1ml的生理鹽水。造模完成以后,后續(xù)飼養(yǎng)過程中,?;撬峤M每
2、天腹腔注射1ml的?;撬幔P徒M與對照組每天腹腔注射1ml的生理鹽水。分別飼養(yǎng)六十天、九十天以后處死取材,處死之前進(jìn)行體重測量,準(zhǔn)備肺系數(shù)的檢測。然后進(jìn)行心臟取血、提取肺組織、肺組織稱重,為肺系數(shù)檢測做準(zhǔn)備。取血之后離心,獲得血漿,用于超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、羥脯氨酸(HYP)、ELISA檢測,分別檢測機體細(xì)胞的抗氧化能力與氧化程度、肺組織纖維化程度以及腫瘤壞死因子的含量。肺組織一部分用甲醛固定,進(jìn)行HE染色,用于觀
3、察肺的纖維化程度。剩下的肺組織用液氮凍存,提取相關(guān)蛋白,為Western Blot檢測做準(zhǔn)備,檢測相關(guān)蛋白的表達(dá)。
結(jié)果:1對照組各時間點大鼠肺組織結(jié)構(gòu)清晰,僅有輕微的炎癥。60d模型組,肺組織局部病灶融合成交大肉芽腫,其中可見較多的巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,形成細(xì)胞性矽結(jié)節(jié);90d模型組矽結(jié)節(jié)數(shù)量多,體積大,其中有大量巨噬細(xì)胞,膠原纖維可見。2與對照組相比,60d、90d模型組大鼠肺系數(shù)及血漿中MDA、HYP、腫瘤壞死因子-α含量
4、均升高(P<0.01),而SOD活力降低(P<0.01);牛磺酸組與模型組相比,肺系數(shù)以及血漿中MDA、HYP、腫瘤壞死因子-α含量均下降(P<0.01),而SOD的活力升高。3通過Western Blot結(jié)果可以看出,60d、90d模型組與對照組相比TNF-α表達(dá)量上調(diào),?;撬峤M與模型組相比TNF-α表達(dá)量下調(diào)。
結(jié)論:1染矽塵后的大鼠肺系數(shù)、MDA和HYP含量以及腫瘤壞死因子-α的表達(dá)升高,SOD的活力下降。2牛磺酸在一定
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