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1、目的:觀察痹祺膠囊對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎CIA大鼠的治療作用,及對(duì)腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、骨保護(hù)素(OPG)和核轉(zhuǎn)錄因子-κB受體活化因子配基(RANKL)表達(dá)的影響。
方法:采用牛Ⅱ型膠原膠(CII)和完全弗氏佐劑(CFA)復(fù)制類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎CIA大鼠模型,設(shè)置空白組、模型組、甲氨蝶呤組(MTX)、痹祺膠囊高中低劑量組,每組各12只。空白組及模型組給予生理鹽水灌胃,MTX組、痹祺膠囊高中低劑量組分別給予MTX、痹祺膠囊高中低劑
2、量灌胃,治療12周后取大鼠血清、踝關(guān)節(jié)。采用水容積法測(cè)量大鼠踝關(guān)節(jié)腫脹度;光鏡下觀察大鼠踝關(guān)節(jié)切片;酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清中TNF-α的表達(dá)水平。免疫組化法(IHC)觀察踝關(guān)節(jié)中RANKL、OPG蛋白的表達(dá)情況;定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(Q-PCR)法及Western blot(WB)法測(cè)定踝關(guān)節(jié)中RANKL、OPG的mRNA表達(dá)。
結(jié)果:
?。?)模型組大鼠踝關(guān)節(jié)紅腫明顯,伴關(guān)節(jié)畸形、活動(dòng)量減少及跛行,關(guān)
3、節(jié)腫脹度明顯增加,各用藥組關(guān)節(jié)腫脹度較模型組有不同程度減輕。
?。?)光鏡下觀察模型組大鼠踝關(guān)節(jié)滑膜及血管翳明顯增生、關(guān)節(jié)破壞明顯,各用藥組均有改善,其中痹祺膠囊高劑量組改善最顯著。
?。?)模型組血清中TNF-α含量明顯升高,各用藥組較模型組均有降低,痹祺膠囊高劑量組降低最顯著(P<0.05);
?。?)模型組大鼠關(guān)節(jié)RANKL mRNA及其蛋白表達(dá)明顯升高(P<0.05),OPG mRNA及蛋白表達(dá)明顯降低,
4、RANKL/OPG的比值升高(P<0.05);與模型組相比,各用藥組RANKL mRNA及其蛋白表達(dá)顯著降低(P<0.05),OPG mRNA及蛋白表達(dá)顯著升高(P<0.05),RANKL/OPG的比值降低(P<0.05),痹祺膠囊高劑量組RANKL/OPG的比值降低最顯著(P<0.05);
?。?)免疫組化顯示MTX組及痹祺膠囊各劑量組RANKL表達(dá)較模型組明顯減少,MTX組及痹祺膠囊各劑量組OPG表達(dá)較模型組明顯增多。
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