漸進(jìn)性咬合紊亂對(duì)大鼠髁突軟骨組織學(xué)及其TNF-α、OPG及RANKL表達(dá)變化的初步研究.pdf

1、咬合異常是顳下頜關(guān)節(jié)紊亂?。╰emporomandibulardisorder，TMD）的重要病因之一。本課題組前期研究結(jié)果表明，漸進(jìn)性咬合紊亂可以導(dǎo)致顳下頜關(guān)節(jié)髁突軟骨異常改建，甚至出現(xiàn)退行性變。本研究以大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，首次施加了二次分牙操作，建立了漸進(jìn)性咬合紊亂模型，HE染色觀察髁突軟骨組織學(xué)變化及軟骨厚度變化；免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)、陽(yáng)性細(xì)胞面積百分比法分析髁突軟骨中TNF-α、OPG、RANKL的表達(dá)特點(diǎn)。探討咬合紊亂對(duì)髁突軟骨內(nèi)

2、細(xì)胞的增殖與分化、軟骨內(nèi)成骨等活動(dòng)的影響，進(jìn)一步增加對(duì)咬合紊亂致髁突軟骨改建的認(rèn)識(shí)。
　　選用48只8周齡SD(Sprague-Dawley)大鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組各4個(gè)時(shí)間點(diǎn)，每組每性別3只。實(shí)驗(yàn)組：以皮筋彈性力推右側(cè)下頜、左側(cè)上頜第一磨牙近中移動(dòng)，4周后同樣方式推右側(cè)下頜、左側(cè)上頜第三磨牙遠(yuǎn)中移動(dòng)，造成漸進(jìn)性咬合紊亂動(dòng)物模型。對(duì)照組：不作任何處理，同環(huán)境飼養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組中大鼠分別于放入最后一個(gè)皮圈后2、4、

3、6、8周處死；取大鼠雙側(cè)顳下頜關(guān)節(jié)作HE染色，以及TNF-α、OPG、RANKL的免疫組化染色。結(jié)果如下：
　　1、對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組大鼠左右側(cè)髁突軟骨厚度間無(wú)差異，故將雙側(cè)合并統(tǒng)計(jì)。雌、雄性大鼠厚度變化無(wú)明顯差異，故合并統(tǒng)計(jì)。對(duì)照組內(nèi)髁突軟骨厚度隨周齡增長(zhǎng)呈逐漸減小的趨勢(shì)，12、14、16周齡組均較10周齡組薄(P<0.05)，16周齡組較12周齡組薄(P=0.035)，而與14周齡組沒(méi)有顯著差異（P>0.05）。實(shí)驗(yàn)4、6、8周組

4、的髁突軟骨厚度較對(duì)照組顯著增厚(P<0.05)，但實(shí)驗(yàn)2周組與對(duì)照組無(wú)明顯差異(P=0.23)。實(shí)驗(yàn)組內(nèi)6周組軟骨厚度明顯大于實(shí)驗(yàn)2、4、8周組(P<0.05)，而后三個(gè)時(shí)間組間沒(méi)有明顯差異（P>0.05）。
　　2、TNF-α主要集中表達(dá)于髁突軟骨的肥大層，對(duì)照組表達(dá)呈現(xiàn)逐漸升高的增齡性變化（P<0.05）。實(shí)驗(yàn)2、6、8周組表達(dá)顯著高于同齡對(duì)照組，且6、8周組高于2周組（P<0.05），實(shí)驗(yàn)4周組與對(duì)照之間無(wú)明顯差異（P>0.

5、05），雌雄變化趨勢(shì)相同。
　　3、OPG主要表達(dá)于髁突軟骨肥大層，對(duì)照組表達(dá)呈現(xiàn)逐漸降低的趨勢(shì)（P<0.05）。雌性實(shí)驗(yàn)2、4、6、8周組陽(yáng)性面積百分比與同齡對(duì)照組相比均呈現(xiàn)出增多的趨勢(shì)(P<0.05），且以實(shí)驗(yàn)6周組增多最為顯著(P=0.001）。雄性實(shí)驗(yàn)2、4、6周組較同齡對(duì)照組表達(dá)均顯著增強(qiáng)(P<0.05），實(shí)驗(yàn)8周組較同齡對(duì)照組差異不明顯（P=0.472）。
　　4.RANKL集中表達(dá)于髁突軟骨肥大層。雄性和雌性實(shí)

6、驗(yàn)組均表現(xiàn)出以下規(guī)律：RANKL在2、6、8周表達(dá)較同齡對(duì)照組陽(yáng)性表達(dá)面積均增大（P<0.05），但實(shí)驗(yàn)4周組與其同齡對(duì)照組無(wú)明顯差異（雄性P=0.201，雌性P=0.467）。雌性實(shí)驗(yàn)6、8周組陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)較4周組強(qiáng)（P<0.05），實(shí)驗(yàn)2、4周組之間差異不顯著（P=0.342）。雄性實(shí)驗(yàn)2、6、8周組均較4周組表達(dá)顯著增強(qiáng)（P<0.05）。通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)得出以下結(jié)論：
　　1、漸進(jìn)性咬合紊亂可以導(dǎo)致大鼠雙側(cè)髁突軟骨出現(xiàn)退行性改變