實驗性咬合紊亂對大鼠髁突軟骨中Sox9、PTHrP及其受體PTH1R表達的影響.pdf

1、本課題組前期研究結(jié)果表明，實驗性咬合紊亂可以導(dǎo)致髁突軟骨出現(xiàn)明顯的病理性改建。軟骨內(nèi)成骨是軟骨重要的生理性改建活動之一，期間軟骨細胞要經(jīng)歷增殖、成熟、肥大以及最終凋亡等階段。PTHrP及其受體PTH1R以及Sox9正是參與軟骨生長發(fā)育的重要的生長調(diào)控因子。PTHrP通過調(diào)節(jié)軟骨細胞分化和成熟的正確比率來調(diào)控軟骨內(nèi)成骨的正常進程，如果軟骨細胞只增殖不成熟、不肥大，骨的生長將止于軟骨形成階段，而如果軟骨細胞加速成熟和肥大，會造成軟骨發(fā)育不良

2、，這兩種骨發(fā)育畸形的情況都與PTHrP及其受體PTH1R的精密調(diào)控有著密切的聯(lián)系。Sox9在軟骨發(fā)育初期起到至關(guān)重要的作用，如果間充質(zhì)細胞凝集前失活Sox9，軟骨的發(fā)育就會出現(xiàn)障礙。本研究是對本課題組所建實驗性咬合紊亂大鼠的下頜髁突軟骨中Sox9、PTHrP及其受體PTH1R等物質(zhì)進行檢測，探討這些大分子物質(zhì)在大鼠髁突病理性改建活動中的表達變化及其重要意義。
　　40只8周齡雌性SD大鼠，隨機、等量分為實驗組和空白對照組，適應(yīng)性飼

3、養(yǎng)3天后，實驗組采用正畸方法以左側(cè)上頜、右側(cè)下頜第一、二磨牙為支抗，推第三磨牙向遠中移動，造成實驗性咬合紊亂?？瞻讓φ詹蛔鋈魏翁幚恚h(huán)境下飼養(yǎng)直至實驗結(jié)束。分別在實驗開始第4、8周后取材，利用HE染色觀察大鼠髁突軟骨的形態(tài)學(xué)變化，利用免疫組化方法、RT-PCR分別檢測Sox9、PTHrP、PTH1R等物質(zhì)蛋白和mRNA水平的變化情況。
　　實驗結(jié)果：
　　1．對照組髁突軟骨表面光滑連續(xù)，可分為纖維層、增殖層、肥大層和鈣化軟

4、骨層，各層細胞排列整齊，界限清晰。實驗組大鼠髁突軟骨出現(xiàn)明顯的凝固性壞死、軟骨細胞數(shù)目明顯減少、胞核固縮、局部嗜均質(zhì)染色等退行性變（3/20個髁突出現(xiàn)典型變化），且實驗組大鼠髁突軟骨后部厚度較對照組明顯增厚（P<0.05）。
　　3．免疫組化染色結(jié)果：PTHrP主要表達于髁突軟骨肥大層，胞漿呈棕色深染，其受體PTH1R主要表達于髁突軟骨肥大層，細胞膜呈棕色深染。與對照組相比，實驗組軟骨退變區(qū)域的PTHrP陽性細胞數(shù)以及PTH1R陽

5、性細胞數(shù)均顯著減少；Sox9主要分布于髁突軟骨肥大層，細胞核呈棕色深染，實驗組軟骨退變區(qū)域的陽性細胞數(shù)較對照組也顯著減少。
　　4．RT-PCR結(jié)果：實驗組8周組髁突軟骨中的PTHrP、PTH1R、Sox9的mRNA水平均較對照組明顯下降。
　　由此得出以下結(jié)論：
　　1．推一側(cè)上頜、對側(cè)下頜第三磨牙向遠中所致的漸進性咬合紊亂可導(dǎo)致雌性大鼠髁突軟骨發(fā)生病理性改建。
　　2．作為軟骨生長發(fā)育進程中的重要調(diào)節(jié)因子，P