功能矯形前伸大鼠下頜后髁突軟骨的改建及VEGF表達(dá)變化的研究.pdf

1、顳下頜關(guān)節(jié)功能的變化與髁突軟骨局部受力密切相關(guān)，而髁突軟骨受力的變化又可以引起局部軟骨發(fā)生改建；本研究以大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，建立了前伸大鼠下頜動(dòng)物模型，采用組織學(xué)染色、免疫組織化學(xué)等方法，觀察大鼠髁突軟骨在下頜前伸不同時(shí)間點(diǎn)內(nèi)的組織形態(tài)改變，以及血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（VEGF）及其受體（Flt-1、Flk-1）在此過(guò)程中的表達(dá)情況，以期就顳下頜關(guān)節(jié)髁突軟骨對(duì)下頜位置改變進(jìn)行的適應(yīng)性改建活動(dòng)進(jìn)行系統(tǒng)研究。 選用5 周齡SD 雄性大鼠5

2、0 只，根據(jù)實(shí)驗(yàn)周期（3、7、14、21 和30 天）分為5 組，每組內(nèi)隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組。 實(shí)驗(yàn)方法：實(shí)驗(yàn)組：利用粘結(jié)材料（磷酸鋅水門?。⑿泵鎸?dǎo)板粘固于大鼠上切牙，通過(guò)固位鉤將鏈狀橡皮圈經(jīng)鼻上頜復(fù)合體與防護(hù)頸圈連接，使得斜面導(dǎo)板獲得穩(wěn)定的固位，防護(hù)頸圈能夠有效地防止大鼠前爪對(duì)裝置的破壞及對(duì)面部組織的傷害，每天持續(xù)佩戴24h；對(duì)照組：不做任何實(shí)驗(yàn)操作。所有動(dòng)物都以軟食飼養(yǎng)，自由飲水，同環(huán)境下飼養(yǎng)至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。實(shí)驗(yàn)后3、7、1

3、4、21和30天分別取材，常規(guī)固定，脫鈣，脫水，包埋。石蠟切片進(jìn)行常規(guī)HE染色，測(cè)量髁突軟骨的厚度；免疫組化方法檢測(cè)VEGF及其受體Flt-1、Flk-1的表達(dá)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：對(duì)照組：對(duì)照組雙側(cè)髁突軟骨厚度無(wú)差異，后份最厚，前份最薄，隨著觀測(cè)時(shí)間的延長(zhǎng)，髁突軟骨呈現(xiàn)增齡性變化，表現(xiàn)為軟骨厚度變薄，其中軟骨中部和后部變化更為顯著，纖維層和增殖層變化不明顯，而肥大層隨時(shí)間減少變薄顯著；VEGF 在軟骨成熟層和肥大層均有表達(dá)，表現(xiàn)為胞漿

4、和胞膜著色，肥大層表達(dá)更為強(qiáng)烈，隨著觀測(cè)時(shí)間點(diǎn)的延長(zhǎng)其表達(dá)下降；Flt-1和Flk-1 主要分布于軟骨成熟層和肥大層，表現(xiàn)為胞漿和胞膜著色，表達(dá)隨時(shí)間點(diǎn)的延長(zhǎng)而減弱；軟骨后部VEGF 及其受體表達(dá)要強(qiáng)于中部和前部。實(shí)驗(yàn)組：中部和后部軟骨厚度較同時(shí)間點(diǎn)的對(duì)照組明顯增加（P<0.05），后部更為明顯，前部軟骨厚度變化不顯著（P＞0.05），軟骨中部和后部纖維層厚度變化不顯著，增殖層細(xì)胞層數(shù)增多，成熟層厚度增加細(xì)胞層數(shù)增多，肥大層厚度增加細(xì)胞

5、體積變大，胞外基質(zhì)增多；實(shí)驗(yàn)組VEGF 表達(dá)強(qiáng)于各自對(duì)照組（P<0.05），實(shí)驗(yàn)后14、21、30 天組較為明顯，其中后部軟骨14 天時(shí)表達(dá)的增強(qiáng)幅度最大；Flt-1、Flk-1 表達(dá)較相應(yīng)對(duì)照組增強(qiáng)（P<0.05），F(xiàn)lt-1 在21 天和30 天組較為明顯（P<0.05），F(xiàn)lk-1在14 天，21 天和30 天組增強(qiáng)明顯（P<0.05），其中Flk-1 在21天時(shí)后部軟骨表達(dá)的增強(qiáng)幅度最大。 結(jié)論： （1）前伸大鼠