功能矯形后退大鼠下頜后髁突軟骨改建的分子機(jī)制.pdf

1、臨床已廣泛開展青少年Ⅲ類錯(牙合)的矯治，在生長發(fā)育高峰期通過施加使下頜骨后退的矯形力是治療早期Ⅲ類骨性或功能性錯(牙合)的常用方法。通過矯形力刺激髁突軟骨的改建，以達(dá)到骨形態(tài)和位置的調(diào)整。但目前功能矯形后髁突軟骨的改建，并進(jìn)而改變下頜骨生長的分子調(diào)控機(jī)制尚不明確。 本研究首先觀察功能性矯治器引導(dǎo)大鼠下頜骨后退后，大鼠顳下頜關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)及下頜骨的形態(tài)變化和組織學(xué)變化。然后采用免疫組化和圖像分析技術(shù)檢測TGF-β1、TGF-βR1、I

2、GF-1在下頜髁突軟骨中的表達(dá)和分布，以及功能矯形后退下頜后，在下頜髁突中表達(dá)的變化，以期闡明功能矯形引導(dǎo)下頜后退，髁突軟骨改建的分子機(jī)制，為功能矯形下頜后退的機(jī)制研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 研究方法1.實(shí)驗(yàn)動物模型制備雄性SD大鼠40只，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對照組。實(shí)驗(yàn)組全天配戴自制模擬臨床的功能矯治器，對照組不戴矯治器，分別在實(shí)驗(yàn)后3d、1w、2w、3w各處死5只，取雙側(cè)髁突，固定、脫鈣、包埋，經(jīng)髁突中央作矢狀切片，常規(guī)HE染色。

3、 2.免疫組織化學(xué)染色采用SABC法，按常規(guī)方法操作。一抗為兔抗TGF-β1、兔抗TGF-βR1、兔抗IGF-1多克隆抗體，DAB顯色。 3.圖像分析采用德國LeicaRX250型圖像分析系統(tǒng)，對髁突軟骨各層的免疫組化陽性染色進(jìn)行定量分析。測量視野中TGF-β1、TGF-βR1、IGF-1陽性染色的相對面積(即陽性細(xì)胞面積/鏡下細(xì)胞及間質(zhì)總面積×100﹪)和陽性染色積分灰度值。 4.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用Epicalc2000

4、1.02統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包，用t檢驗(yàn)對實(shí)驗(yàn)組和對照組間的各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行比較分析。 研究結(jié)果1.形態(tài)學(xué)觀察根據(jù)磨牙關(guān)系可見實(shí)驗(yàn)組大鼠下頜后退1-2mm。鏡下見關(guān)節(jié)后間隙變窄，前間隙增寬，髁突軟骨厚度增加，以生發(fā)層和過渡層厚度增加明顯，成熟層稍增厚，移行層變薄。細(xì)胞數(shù)增多，細(xì)胞體積增大，核肥大深染，細(xì)胞間質(zhì)減少。 2.免疫組化染色實(shí)驗(yàn)組、對照組大鼠髁突各層軟骨細(xì)胞均有TGF-β1、TGF-βR1和IGF-1的陽性表達(dá)，陽性染色定位于

5、胞漿和胞核。在髁突各層細(xì)胞中，成熟層TGF-β1和TGF-βR1強(qiáng)陽性，生發(fā)層和過渡層IGF-1強(qiáng)陽性。實(shí)驗(yàn)組髁突軟骨細(xì)胞各層TGF-β1、TGF-βR1和IGF-1的陽性表達(dá)程度均明顯高于對照組。 3.圖像分析結(jié)果實(shí)驗(yàn)組大鼠髁突軟骨細(xì)胞各層TGF-β1、TGF-βR1和IGF-1陽性染色的相對面積和積分灰度值均高于對照組，除個別數(shù)據(jù)外，其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 結(jié)論1.建立了運(yùn)用功能矯治器使大鼠下頜后退的