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1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?評(píng)價(jià)低強(qiáng)度He-Ne激光對(duì)髁突軟骨改建的影響,本實(shí)驗(yàn)以大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,制作安氏Ⅱ類(lèi)錯(cuò)(牙合)畸形的功能性前伸下頜矯治模型,顯微測(cè)量髁突軟骨厚度,并運(yùn)用免疫組化的方法檢測(cè)VEGF的表達(dá)情況。
實(shí)驗(yàn)方法:選用5周齡雄性Sprague-Dawley大鼠60只,隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組和空白組(3、7、14、21天)。實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組大鼠上切牙用磷酸鋅水門(mén)汀粘斜面導(dǎo)板,并用正畸透明壓膜材料制作頸圈以防止大鼠前爪及后腿破壞斜面導(dǎo)板
2、。實(shí)驗(yàn)組大鼠戴上斜面導(dǎo)板后即刻用20mw的632.8nm的氦氖激光(helium-neon laser)照射顳下頜關(guān)節(jié)區(qū),每天一次,每次9分鐘/側(cè),每只雙側(cè)照射。對(duì)照組大鼠僅佩戴斜面導(dǎo)板及頸圈,不接受激光照射。空白組大鼠無(wú)任何實(shí)驗(yàn)處理。所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均軟食飼養(yǎng),自由飲水,置于23℃恒溫實(shí)驗(yàn)環(huán)境。實(shí)驗(yàn)后3、7、14、21天分別取雙側(cè)髁突,放于4℃恒溫冰箱中,用4%多聚甲醛固定24h,13%EDTA脫鈣10天,再逐級(jí)酒精脫水,石蠟包埋。石蠟切
3、片進(jìn)行HE染色,測(cè)量髁突軟骨厚度;免疫組化方法檢測(cè)VEGF的表達(dá)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
1、根據(jù)磨牙關(guān)系可見(jiàn)實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組大鼠下頜前伸后咬合無(wú)偏斜,平均前伸量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
2、功能性前伸下頜后引起大鼠髁突軟骨厚度的變化。鏡下見(jiàn)實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組比空白組關(guān)節(jié)后間隙增寬,前間隙縮窄,軟骨中份和后份細(xì)胞體積增大,軟骨層厚度增加,肥大層和成熟層細(xì)胞核肥大深染,細(xì)胞間質(zhì)增加。
3、實(shí)驗(yàn)組與空白組髁突7天即呈現(xiàn)出明顯差
4、異,而對(duì)照組直到實(shí)驗(yàn)后14天才能出現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比髁突軟骨中份、后份14天組及21天組增厚顯著。
4、VEGF陽(yáng)性DAB顯色表現(xiàn)為軟骨細(xì)胞的胞漿、包膜均可見(jiàn)棕黃色深染顆粒。染色分布于髁突軟骨的肥大層及成熟層;增殖層弱表達(dá),纖維層未見(jiàn)VEGF陽(yáng)性表達(dá)。實(shí)驗(yàn)組髁突軟骨中份、后份的表達(dá)增強(qiáng),第7天即與空白組出現(xiàn)差異,而對(duì)照組一直到第14天組才與空白組出現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差異,且實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比較,在第14天組及第21
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