不同大小和不同年齡段大鼠背根神經(jīng)節(jié)中HCN通道特性研究.pdf

1、疼痛作為一種復雜的生理和心理活動，與個體的性別，種族和年齡有很大的相關性。已經(jīng)有研究證實，隨著年齡的變化，機體對疼痛的敏感度也會發(fā)生相應的變化。背根神經(jīng)節(jié)（dorasl root ganglion，DRG）屬于初級感覺神經(jīng)，并且在神經(jīng)傳遞中起著重要功能作用，不同大小的DRG神經(jīng)元在信號傳導過程中起到的功能和作用也不相同。一般來說，機體受到刺激，細胞膜上的相關離子通道就會產(chǎn)生相應的變化，這構成細胞興奮的基礎，同樣也是生物電生理現(xiàn)象的基礎。

2、有研究表明，超過60％的疾病都和離子通道有關，即膜蛋白的功能水平和表達水平上發(fā)生了變化。一般將離子通道可以分為電壓門控離子通道、配體門控離子通道、胞內(nèi)信號門控通道和機械敏感通道四種類型。超極化激活的環(huán)核苷酸門控（Hyperpolarization activated cyclic nucleotide-gated，HCN）通道是一種由cAMP和電壓共同調(diào)控的陽離子通道，對陽離子通過具有非選擇性，參與多種神經(jīng)活動，如調(diào)控靜息電位，信號傳遞

3、和突觸整合，在大鼠的初級感覺神經(jīng)DRG中，HCN通道在對動作電位產(chǎn)生的頻率和振幅和對細胞興奮性的調(diào)控上起到重要作用。為了研究不同大小和不同年齡段的DRG神經(jīng)元上HCN通道特性，我們使用急性分離的大鼠背根神經(jīng)節(jié)細胞進行膜片鉗全細胞實驗，通過超極化電壓刺激記錄不同年齡段不同大小的DRG神經(jīng)元上HCN通道電流，并通過計算得到不同細胞電流密度（Current Density），半激活電壓（V1/2）和激活動力學（Kinetics）等相關通道參數(shù)

4、。應用單細胞RT-PCR技術研究不同大小和不同年齡段大鼠背根神經(jīng)節(jié)中單個神經(jīng)細胞上HCN通道四種亞型的轉錄水平，通過單細胞RT-PCR技術對HCN通道電流發(fā)生的變化尋找相應的分子水平依據(jù)。實驗發(fā)現(xiàn)，V1/2會隨細胞大小和年齡段的變化而變化，在老年鼠的中小DRG細胞中的HCN1和HCN3有較弱的表達，新生鼠的HCN2和老年鼠的HCN4也有較弱的表達，這也許是由于衰老的作用，單細胞RT-PCR轉錄水平實驗結果與電生理數(shù)據(jù)相符合。這對我們研究