α1-腎上腺素在前列腺Cajal間質(zhì)細(xì)胞上的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：
　　通過(guò)體外分離豚鼠前列腺、切片、體外分離培養(yǎng)前列腺Cajal間質(zhì)細(xì)胞（ICCs）及雙標(biāo)免疫熒光從組織學(xué)及細(xì)胞學(xué)角度觀察α1腎上腺素受體在前列腺上的表達(dá)，探究α1-腎上腺素受體在豚鼠前列腺I(mǎi)CCs上的表達(dá)及其生理意義，為深入研究前列腺增生癥、慢性前列腺炎及早泄等與前列腺平滑肌功能紊亂的相關(guān)疾病奠定基礎(chǔ)。
　　方法：
　　本課題以成年豚鼠前列腺I(mǎi)CC為研究對(duì)象。制作豚鼠前列腺組織冰凍切片及體外培養(yǎng)的豚鼠前列腺細(xì)胞

2、進(jìn)行雙重免疫熒光染色，使用酪氨酸激酶受體(c-Kit)作為ICCs的標(biāo)記物，α肌動(dòng)蛋白（α-actin）標(biāo)記平滑肌細(xì)胞，分別進(jìn)行c-Kit與α1-腎上腺素受體、α-actin與α1-腎上腺素受體配對(duì)的免疫熒光雙標(biāo)記染色。
　　結(jié)果：
　　豚鼠前列腺組織經(jīng)切片、雙標(biāo)免疫熒光染色后，c-Kit染色陽(yáng)性的ICCs分布于平滑肌之間，c-Kit與α1-腎上腺素受體抗體在ICCs上均染色陽(yáng)性，平滑肌上α1-腎上腺素受體染色陽(yáng)性。且ICC

3、s上α1-腎上腺素受體染色明顯較平滑肌上α1-腎上腺素受體染色深。體外分離培養(yǎng)的前列腺I(mǎi)CCs呈梭形或星形，分布于平滑肌中，細(xì)胞相對(duì)于平滑肌細(xì)胞較小，ICCs借細(xì)胞兩側(cè)突起與周邊 ICC或SMC連接在一起呈網(wǎng)狀分布。體外分離培養(yǎng)的豚鼠前列腺I(mǎi)CCs，染色后置于激光共聚焦顯微鏡下觀察，ICCs上同時(shí)存在c-Kit受體與α1-腎上腺素受體。此外，體外分離培養(yǎng)的前列腺I(mǎi)CCs占混合細(xì)胞培養(yǎng)的少數(shù)，絕大多數(shù)細(xì)胞為前列腺平滑肌細(xì)胞，其細(xì)胞相對(duì)于I

4、CCs較大，其形態(tài)多樣，倒置顯微鏡下很容易與ICCs細(xì)胞鑒別，細(xì)胞多聚集在一起呈團(tuán)塊狀。
　　結(jié)論：
　?。?）前列腺I(mǎi)CCs上確實(shí)存在α1-腎上腺素受體。
　?。?）α1-腎上腺素受體在前列腺I(mǎi)CCs上的表達(dá)明顯高于在前列腺平滑肌上的表達(dá)。
　?。?）前列腺I(mǎi)CCs與前列腺平滑肌形成“神經(jīng)信號(hào)-ICCs-平滑肌”這一信號(hào)傳遞系統(tǒng)可能參與射精的調(diào)節(jié)過(guò)程，具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。
　　（4）體外成功分離培養(yǎng)出