酵母菌發(fā)酵對熟地黃生物活性的影響研究.pdf

1、生地黃經(jīng)炮制變成熟地黃，由一種清熱涼血藥變成一種補(bǔ)益藥。前期研究表明熟地黃炮制過程中發(fā)生了美拉德反應(yīng)，產(chǎn)生大量5-羥甲基糠醛（5-HMF），同時(shí)還原糖含量大幅度增加;經(jīng)酵母菌發(fā)酵后其中5-HMF和小分子糖類被降解，對大鼠Ⅰ型糖尿病并發(fā)癥的預(yù)防效果得到改善。這一結(jié)果提示5-HMF和小分子糖類可能不是熟地黃的有效成分，但是文獻(xiàn)報(bào)道5-HMF和地黃寡糖具有多種生物活性。究竟5-HMF和地黃寡糖對熟地黃功效是否有貢獻(xiàn)，需要進(jìn)一步研究。本研究在前

2、期研究的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步評價(jià)酵母菌發(fā)酵對熟地黃生物活性的影響。主要內(nèi)容如下:
　　(1)熟地黃、發(fā)酵熟地黃和5-HMF對甲氨蝶呤化療所致大鼠急性肝腎損傷的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)熟地黃和發(fā)酵熟地黃均顯著降低血清谷草轉(zhuǎn)氨酶、血尿素氮、尿糖、尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)的含量;而5-HMF僅顯著降低尿NAG含量，對其它指標(biāo)影響不顯著。
　　(2)長時(shí)間飼喂含熟地黃、發(fā)酵熟地黃和5-HMF飼料對正常大鼠的影響。發(fā)現(xiàn)熟地黃使大鼠尿液

3、鈣、鎂和鈉離子排出增加，糞便顆粒變大，排便量及糞氮排出量增加，而發(fā)酵熟地黃和5-HMF影響不顯著。
　　(3)5-HMF與人血清白蛋白的結(jié)合規(guī)律。熒光光譜法揭示5-HMF與白蛋白孵育不同時(shí)間，計(jì)算所得的結(jié)合位點(diǎn)數(shù)相似，均稍大于1;而HPLC檢測發(fā)現(xiàn)5-HMF與白蛋白隨時(shí)間增加其結(jié)合量逐漸增加，剩余5-HMF與孵育時(shí)間之間的關(guān)系符合反S型曲線;此外，質(zhì)譜檢測表明5-HMF與白蛋白的結(jié)合屬于非共價(jià)結(jié)合。
　　本論文結(jié)果表明:酵母