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1、高壓條件下,酵母菌細(xì)胞受到刺激后發(fā)生應(yīng)激性反應(yīng).海藻糖是很多生物體受環(huán)境脅迫所產(chǎn)生的重要的應(yīng)激性代謝產(chǎn)物之一,它是由兩個(gè)葡萄糖分子結(jié)合組成的非還原性雙糖,由于它對(duì)生物大分子具有非特異性保護(hù)作用,從而在食品、醫(yī)藥、生物化學(xué)等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用.本文研究主要內(nèi)容為壓力條件下酵母菌積累海藻糖最佳條件的確立、不同酵母菌積累胞內(nèi)海藻糖隨處理時(shí)間的變化和相應(yīng)合成酶系活力的研究、不同酵母菌種及其他條件下細(xì)胞的變化等.首先本文以面包酵母為研究菌株,初
2、步研究了壓力條件下不同壓力值、處理時(shí)間、反應(yīng)溫度、pH值、升降壓速率、處理前培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)基等因素對(duì)菌體積累海藻糖所產(chǎn)生的影響.確定了壓力為0.5~1.0MPa,反應(yīng)處理時(shí)間為3h,反應(yīng)溫度為34℃,發(fā)酵液pH值調(diào)整為6.0,升降壓速率為0.05~0.10MPa/min,選用復(fù)合培養(yǎng)基為酵母菌積累胞內(nèi)海藻糖的最適條件.其次研究了六種不同酵母菌在1.0MPa的壓力條件下,菌體積累海藻糖(可能還有其他低分子量的應(yīng)激性代謝產(chǎn)物)與高壓處理時(shí)間
3、的關(guān)系,說明不同酵母菌種對(duì)壓力具有不同的敏感性;它們之間的不同說明海藻糖的合成途徑可能有多種方式,即便是同一種生物中,也有可能存在一種以上的合成途徑.同時(shí)確立了一種測(cè)定海藻糖合成酶系活力的方法,以2﹪甲苯和0.2﹪EDTA溶液作為細(xì)胞滲透劑處理酵母細(xì)胞,以1.0﹪的葡萄糖溶液作為酶促反應(yīng)的底物,采用生物傳感儀—硫酸蒽酮顯色法測(cè)定了相應(yīng)的海藻糖合成酶系的活力.最后以掃描式電子顯微鏡拍攝圖像,說明經(jīng)過高壓處理后酵母菌體細(xì)胞發(fā)生變形,胞質(zhì)和內(nèi)
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