酵母菌數(shù)量變化

1、培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化,探究實(shí)驗(yàn),單細(xì)胞真核生物生長(zhǎng)周期短，增殖速度快還可以用酵母菌作為實(shí)驗(yàn)材料研究 探究酵母菌的呼吸方式,酵母菌,,一、提出問(wèn)題：,培養(yǎng)液中酵母菌種群是怎樣隨時(shí)間變化的？,二、作出假設(shè)：,,酵母菌在培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，由于食物，空間資源等是有限的，種群增長(zhǎng)呈現(xiàn)“S”型曲線；后期因環(huán)境急劇惡化，種群逐漸消亡。,—————————————————————————————————————————

2、———————————————————,三、討論探究思路,血細(xì)胞計(jì)數(shù)板(血球計(jì)數(shù)板),方法名稱：使用范圍：,顯微計(jì)數(shù)(抽樣檢測(cè)),①調(diào)查細(xì)胞數(shù)量時(shí)； ②肉眼看不見(jiàn)的細(xì)菌、酵母菌等微生物,問(wèn)題一：怎樣進(jìn)行酵母菌的計(jì)數(shù)？,1、血球計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu),血球計(jì)數(shù)板是一種專門(mén)用于計(jì)算較大單細(xì)胞微生物數(shù)量的儀器，由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的，玻片中有四條下凹的槽，構(gòu)成三個(gè)平臺(tái)。中間的平臺(tái)較寬，其中間又被一短橫槽隔

3、為兩半，每半邊上面刻有一個(gè)方格網(wǎng)。,方格網(wǎng)上刻有9個(gè)大方格，其中只有中間的一個(gè)大方格為計(jì)數(shù)室，供微生物計(jì)數(shù)用。,,,大方格的長(zhǎng)和寬各為1mm，深度為0.1mm，即1mm×1mm×0.1mm，其容積為0.1mm3；,,,,,,大方格,,,,,,,中方格,,小方格,,,,16 （中格）×25 （小格）,25（中格）×16（小格）,3、血球計(jì)數(shù)板的分區(qū)與分格,不管計(jì)數(shù)室是哪一種構(gòu)造，其每一大方格都是由1

4、6×25=25×16=400個(gè)小方格組成。,2、計(jì)數(shù),,,,,16×25型： 一般取四角的四個(gè)中方格（100個(gè)小方格）計(jì)數(shù),,25×16型： 一般計(jì)數(shù)四個(gè)角和中央的五個(gè)中方格（80個(gè)小方格）的細(xì)胞數(shù)。,,,,,,例1 通常用血球計(jì)數(shù)板對(duì)培養(yǎng)液中酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，若計(jì)數(shù)室為1mm×1mm×0.1mm方格，由400個(gè)小方格組成。若多次重復(fù)計(jì)數(shù)后，算得每個(gè)小方格

5、中平均有5個(gè)酵母菌，則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有      個(gè)。,2×108,例2 檢測(cè)員將1 mL水樣稀釋10倍后，用抽樣檢測(cè)的方法檢測(cè)每毫升藍(lán)藻的數(shù)量；將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計(jì)數(shù)室，并用濾紙吸去多余液體。已知每個(gè)計(jì)數(shù)室由25×16＝400個(gè)小格組成，容納液體的總體積為0．1 mm3。,現(xiàn)觀察到圖中該計(jì)數(shù)室所示a、b、c、d

6、、e 5個(gè)中格80個(gè)小格內(nèi)共有藍(lán)藻n個(gè)，則上述水樣中約有藍(lán)藻 個(gè)／mL。,5n×105,3、計(jì)算,b表示培養(yǎng)液稀釋倍數(shù)；用所數(shù)小方格中細(xì)胞總數(shù)/所數(shù)小方格數(shù)是為求得每個(gè)小方格中的細(xì)胞總數(shù)。,4、血球計(jì)數(shù)板的使用方法步驟,③ 計(jì)數(shù)： 稍待片刻（約5min），待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部后，將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)的中央，先在低倍鏡下找到計(jì)數(shù)室所在位置后，再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察、計(jì)數(shù)并記錄

7、。,① 鏡檢計(jì)數(shù)室： 在加樣前，先對(duì)計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室進(jìn)行鏡檢。若有污物，則需清洗，吹干后才能進(jìn)行計(jì)數(shù)。,② 加樣品： 將清潔干燥的血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室上加蓋專用的蓋玻片，用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入，一次性充滿計(jì)數(shù)室，防止產(chǎn)生氣泡，充入細(xì)胞懸液的量以不超過(guò)計(jì)數(shù)室臺(tái)面與蓋玻片之間的矩形邊緣為宜。多余培養(yǎng)液可用濾紙吸去。,——從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，要將試管輕輕震蕩幾下，這樣使酵母菌

8、分布均勻，防止酵母凝聚沉淀，提高計(jì)數(shù)的代表性和準(zhǔn)確性，求得的培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量誤差小。,問(wèn)題二：從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，應(yīng)該將試管輕輕震蕩幾次，為什么？,一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過(guò)多，難以數(shù)清，應(yīng)當(dāng)對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋以便于酵母菌的計(jì)數(shù)。 具體方法是：搖勻試管，取1mL酵母菌培養(yǎng)液，加入成倍的無(wú)菌水稀釋，稀釋n倍后，再用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，所得數(shù)值乘以稀釋倍數(shù)。以每小方格內(nèi)含有4～5個(gè)酵母細(xì)胞為宜。特別是在培養(yǎng)后期的樣液需要稀釋后計(jì)