極性二肽與一價(jià)金屬離子間相互作用及DNA切割活性的研究.pdf

1、A t h e s i s ( d i s s e r t a t i o n ) s u b m i t t e d t oZ h e n g z h o u U n i v e r s i t yF o r t h ed e g r e eo f M a s t e rR e s e a r c h o f t h e I n t e r a c t i o n b e t w e e n p o l a r d i p e p t

2、 i d e sa n dm o n o v a l e n t m e t a l i o n sa n d t h e i r D N A c l e a v a g e a c t i v i t yB y Z h u Z i h o n gS u p e r v i s o r ：P r o f ．Y u f e n Z h a oD o c ．Y a n c h u n G u oO r g a n i c C h e m i

3、 s t r yT h e C o l l e g e o f C h e m i s t r y a n d M o l e c u l a r E n g i n e e r i n gM a y 2 0 1 3摘要摘要肽類化合物是由兩個(gè)氨基酸或者多個(gè)氨基酸脫水縮合得到的一類化合物。這類化合物在自然界中廣泛存在。肽類化合物作為一類具有廣泛生物活性的分子，在形成荷爾蒙、抗生素、抗真菌素、毒素、癌抑制劑以及離子載體系統(tǒng)等方面展現(xiàn)出了巨大

4、作用；同時(shí)這類化合物與金屬離子配合后同樣也具有一定的生物活性，由于它們具有與生命息息相關(guān)的生物活性，所以肽類化合物的研究越來(lái)越引起人們的關(guān)注。本文在前人研究的基礎(chǔ)上，利用凝膠電泳的方法考察了1 1 種極性二肽( L ．天冬氨酸二肽，L ．精氨酸二肽，L ．蘇氨酸二肽，L ．脯氨酸二肽，L ．組氨酰賴氨酸二肽，L ．天冬氨酰脯氨酸二肽，L ．谷氨酰胺酰甘氨酸二肽，L ．天冬氨酰酪氨酸二肽，L ．谷氨酸二肽，L ．酪氨酰精氨酸二肽，L ．蘇

5、氨酸環(huán)二肽) 自身及其在二價(jià)金屬離子作用下，對(duì)p U C l 9 質(zhì)粒D N A 的切割活性。同時(shí)，利用凝膠電泳法分別從緩沖溶液、金屬離子、濃度、p H 值、反應(yīng)時(shí)間五個(gè)方面考察了具有較強(qiáng)切割活性的極性二肽在切割p U C l9 質(zhì)粒D N A 時(shí)的最佳條件。在所研究的1 1 種極性二肽中，發(fā)現(xiàn)蘇氨酸環(huán)二肽在沒(méi)有金屬離子參與的情況下，對(duì)p U C l 9 質(zhì)粒D N A 也具有切割作用，其D N A 的切割率達(dá)到8 0 ％以上：而其他極

6、性二肽，只有在金屬離子存在的情況下，才具有切割活性。例如蘇氨酸鏈狀二肽在M 9 2 + 的作用下對(duì)p U C 19 質(zhì)粒D N A 具有切割作用，切割率達(dá)到8 0 ％以上；L ．天冬氨酰脯氨酸二肽在C a 2 + 作用下對(duì)p U C l 9 質(zhì)粒D N A 有切割作用；L ．天冬氨酸二肽在二價(jià)金屬離子C 0 2 + 、C a 2 + 的輔助下對(duì)D N A 的切割活性也很明顯：L ．組氨酰賴氨酸二肽在C a 2 + 離子的輔助下也有很好的

7、切割活性；L 一谷氨酸二肽與M 9 2 + 相互作用對(duì)D N A 也具有少量的切割作用。對(duì)于極性二肽的切割機(jī)理，我們也做了初步的探討，研究發(fā)現(xiàn)不論是否有金屬離子的輔助，其切割機(jī)理均為水解機(jī)理。本文利用高效液相色譜法( 瑚，L C ) ，電噴霧質(zhì)譜法( E S I ．M S ) 分別測(cè)定了極性二肽與一價(jià)金屬離子的結(jié)合常數(shù)，并由此判斷不同的極性二肽與一價(jià)金屬離子間作用力的強(qiáng)弱。高效液相色譜法采用的是F u j i m u r a 方法，在有