姜黃素和大黃素對福美雙誘導(dǎo)的肉雞脛骨軟骨發(fā)育不良的治療作用及分子機制研究.pdf

1、肉雞脛骨軟骨發(fā)育不良(TD)是發(fā)生在快速生長禽類中的一種病因不明的疾病。TD的典型病變可見于脛骨近骺端，其主要特征是無血管化和無鈣化?；糡D的家禽表現(xiàn)為身體狀況差，脛骨骨骼變形，行走困難。這種疾病在全世界不僅造成巨大的經(jīng)濟損失，而且也帶來了嚴重的動物福利問題。
　　中草藥一直被用于治療各種疾病，相比化學(xué)合成藥物，它具有副作用較小、生產(chǎn)成本低廉等特性，適合長期的服用。
　　1.姜黃素修復(fù)福美雙誘發(fā)肉雞脛骨軟骨發(fā)育不良中的生長板

2、發(fā)育異常
　　姜黃素是一種鮮黃色的香料，黃素是從姜科、天南星科中的一些植物的根莖中提取的一種姜黃多酚，被稱為姜黃。姜黃素被認為可通過抑制破骨細胞的生成來抑制骨吸收。它是調(diào)控和參與骨重塑的重要分子靶點。然而，目前尚無采用姜黃素治療肉雞TD的研究報道。本試驗旨在研究姜黃素對TD損傷、禽類的生長性能、脛骨參數(shù)及對血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和Dlx5基因表達的影響;同時分析了不同處理條件下肉雞肝臟中的相關(guān)酶類(ALT、ALP、AST)和

3、抗氧化(SOD、MDA、GSH-Px)水平。本試驗將400只AA肉雞平均分為4組:對照組、TD組、TDR（自然恢復(fù)組）和CUR（姜黃素給藥組）。對照組從第1天至第18天喂食標準日糧。TD組從第1天至第3天喂食標準飼料，并且從第4天至第18天喂食含福美雙(50mg/kg)的日糧。TDR組從第1天至第3天飼喂標準日糧，第4天至第7天飼喂含有福美雙(50mg/kg)的日糧以誘發(fā)該疾病，然后從第8天至第18天繼續(xù)飼喂標準日糧以觀察肉雞TD的恢復(fù)

4、能力。CUR組從第1天至第3天飼喂標準日糧，第4天至第7天喂含福美雙的日糧，從第8天至第18天喂食標準日糧的同時應(yīng)用姜黃素(200mg/kg)。分別于第7、10、14和18天從各組隨機挑選肉雞，屠宰，評估相關(guān)指標。通過RT-qPCR、免疫組織化學(xué)和蛋白質(zhì)印跡試驗發(fā)現(xiàn):患TD的肉雞GP中VEGF的表達量顯著上調(diào)，而Dlx5的表大量顯著下調(diào)(P＜0.05)。給予姜黃素后，VEGF的表達量顯著下調(diào)，而Dlx5的表大量顯著上調(diào)。脛骨的H&E病理

5、切片顯示患TD的肉雞軟骨細胞分布紊亂、細胞核溶解;姜黃素處理后，細胞恢復(fù)了正常的形態(tài)結(jié)構(gòu)。生化結(jié)果顯示:患TD的肉雞生化指標ALT、AST和MDA升高，ALP、SOD和GSH-Px降低。姜黃素治療組后，相關(guān)生化、抗氧化指標和脛骨參數(shù)接近于對照組。同時，TDR組中的肉雞身體狀況優(yōu)于TD組，除極少數(shù)參數(shù)外，其他結(jié)果差異不大。
　　2.大黃素對福美雙誘導(dǎo)的肉雞脛骨軟骨發(fā)育不良中ALP、PPARγ和Ⅰ型膠原基因表達的影響
　　大黃素

6、是一種蒽醌衍生物，廣泛存在于各種天然藥材中。數(shù)千年來它被用于治療包括骨疾病在內(nèi)的各種疾病。本試驗將系統(tǒng)的研究大黃素對TD的治療效果（本試驗設(shè)計、檢測參數(shù)和技術(shù)見試驗1）。通過RT-qPCR、免疫組織化學(xué)和蛋白質(zhì)印跡試驗發(fā)現(xiàn):TD組肉雞中的ALP表達顯著下調(diào)(P＜0.05)，血清中ALP水平也下降。給予大黃素可顯著上調(diào)GP中ALP水平，增加血清中ALP的含量。TD組PPARγ基因的表達上調(diào)，PPARγ的活化增加了骨吸收，然而大黃素治療后發(fā)