新型5-HT重?cái)z取抑制劑DAI1抗早泄作用及其機(jī)制研究.pdf

1、背景：5-羥色胺重?cái)z取抑制劑(SSRIs)是常用的一類抗抑郁藥物，但因5-羥色胺(5-HT)抑制射精作用，現(xiàn)在臨床上也將其用來(lái)研究治療早泄（premature ejaculation，PE），其中 SSRIs類藥物達(dá)泊西汀已作為早泄治療藥物在歐盟上市。本課題組對(duì)以達(dá)泊西汀為先導(dǎo)化合物合成的一系列新型化合物進(jìn)行體內(nèi)外篩選，篩選確定與5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（SERT）有高親合力、代號(hào)為DAI1的化合物作為抗早泄候選化合物。
　　目的：建立

2、多種早泄動(dòng)物模型，評(píng)價(jià) DAI1治療早泄的藥效學(xué)作用，并開(kāi)展相應(yīng)的作用機(jī)理研究，以期發(fā)現(xiàn)可按需服用的治療早泄的藥物。
　　方法：1.達(dá)泊西汀系列衍生物抗PE活性評(píng)價(jià)及候選化合物DAI1確定：（1）采用放射性配基結(jié)合實(shí)驗(yàn)，評(píng)價(jià)受試化合物對(duì)SERT的親和力；（2）建立對(duì)氯苯異丙胺(p-chloroamphetamine，PCA)誘發(fā)大鼠射精模型，通過(guò)陽(yáng)性藥達(dá)泊西汀和帕羅西汀對(duì)大鼠球海綿體肌(bulbospongiosus muscle

3、s， BS)的節(jié)律性收縮以及大鼠精囊(seminal vesicle，SV)壓力的作用確立模型的成功；比較研究受試化合物對(duì)BS的節(jié)律性收縮的影響。（3）急性給予受試化合物觀察受試化合物的毒性反應(yīng)評(píng)價(jià)安全性。
　　2. DAI1抗早泄量效關(guān)系研究：（1）利用PCA誘發(fā)大鼠射精的模型，評(píng)價(jià)DAI1不同劑量對(duì)大鼠球海綿體肌的節(jié)律性收縮以及大鼠精囊壓力的影響。（2）建立性行為檢測(cè)模型，通過(guò)急性以及慢性給藥觀察 DAI1不同劑量對(duì)大鼠射精功

4、能的影響，記錄射精潛伏期（ejaculation latency，EL），騎跨潛伏期（mount latency，ML），插入潛伏期（intromission latency，IL），騎跨次數(shù)（mount frequency，MF），插入的次數(shù)（intromission frequency，IF），射精后間期（postejaculatory interval，PEI），判斷DAI1是否有延遲射精的作用。
　　3. DAI1作用機(jī)制

5、研究：（1）采用放射性配基結(jié)合實(shí)驗(yàn)，評(píng)價(jià)DAI1對(duì)SERT，去甲腎上腺素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（NET），5-HT1A受體的親和力。（2）通過(guò)對(duì)酶活力測(cè)定，評(píng)價(jià)DAI1對(duì)大鼠腦組織單胺氧化酶A(MAO-A)活力的影響。（3）采用高效液相色譜法（HPLC-ECD）檢測(cè)DAI1對(duì)PCA模型大鼠海馬、前額皮層、下丘腦單胺遞質(zhì)含量的影響。（4）采用酶聯(lián)免疫分析法對(duì)大鼠血清睪酮分析，評(píng)價(jià) DAI1對(duì)大鼠血清睪酮的影響。
　　結(jié)果：1.達(dá)泊西汀系列衍生物抗

6、PE活性評(píng)價(jià)及候選化合物DAI1確定：（1）通過(guò)放射性配基結(jié)合實(shí)驗(yàn)，DAI1，DAI2，DAI3，DAII1對(duì)SERT的親和力較強(qiáng)；（2） PCA誘發(fā)大鼠射精模型中，PCA組可誘發(fā)大鼠球海綿體肌的節(jié)律性次數(shù)和射精次數(shù)增加，精囊壓力變化次數(shù)增多，并且壓力最大變化幅度增高，同時(shí)縮短大鼠射精時(shí)間，陽(yáng)性藥達(dá)泊西?。?.3，1，3 mg/kg，iv）和陽(yáng)性藥帕羅西汀（0.1，0.3，1，3 mg/kg， iv）均顯著抑制大鼠射精，且達(dá)泊西汀作用呈

7、劑量依賴性。同時(shí)利用該模型研究四個(gè)受試化合物也表現(xiàn)出抑制射精的作用。（3）急性毒性初步實(shí)驗(yàn)中 DAI1較其它受試化合物安全性較好。
　　2. DAI1抗早泄量效關(guān)系研究：1.在PCA誘發(fā)大鼠射精模型中， DAI1單次給藥可逆轉(zhuǎn)PCA組大鼠球海綿體肌的節(jié)律性次數(shù)和射精次數(shù)增加，精囊壓力變化次數(shù)增多，壓力最大變化幅度增高以及大鼠射精時(shí)間的縮短，并且可呈劑量依賴性（0.3，1，3mg/kg，iv）。（2）大鼠性行為檢測(cè)模型中，DAI1單

8、次給藥(20mg/kg，ig)和給藥14天(3，10mg/kg，ig)，與正常組比較，射精潛伏期顯著延長(zhǎng)；MF，ML，IF，IL， PEI與正常組比較未有顯著性差異。
　　3. DAI1抗早泄作用機(jī)制研究：（1）靶標(biāo)研究：放射性配基結(jié)合實(shí)驗(yàn)顯示，DAI1對(duì)SERT有高親和力，與NET，5-HT1A受體親和力較弱。（2）酶活力測(cè)定結(jié)果表明DAI1對(duì)大鼠腦組織單胺氧化酶MAO-A活力無(wú)影響。（3）HPLC-ECD結(jié)果表明PCA模型大鼠