Eg5基因表達(dá)調(diào)控及其抑制劑抗胰腺癌作用的分子機(jī)制.pdf

1、在細(xì)胞分裂過程中,有絲分裂紡錘體控制染色體的分離。紡錘體是具有雙極性的結(jié)構(gòu),由微管和微管結(jié)合蛋白組成。紡錘體的雙極性對于染色體的精確分離是必需的,而雙極性的形成則依賴于微管依賴性馬達(dá)蛋白。Eg5是屬于驅(qū)動(dòng)蛋白家族的一個(gè)馬達(dá)蛋白,在雙極紡錘體的組裝過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。除了在紡錘體組裝中起作用之外,最近的研究表明Eg5可能通過影響基因組的穩(wěn)定性,參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展。但是,關(guān)于Eg5在細(xì)胞中的表達(dá)是如何被調(diào)控的一直不清楚。另外,抑制Eg5活性

2、的小分子化合物作為治療癌癥的新一代藥物是當(dāng)前研究的熱點(diǎn),有些Eg5抑制劑已經(jīng)作為癌癥化療藥物進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段。由于Eg5主要在處于分裂中的細(xì)胞內(nèi)起作用,在分裂后的神經(jīng)細(xì)胞中很難被檢測到,因此在癌癥治療中Eg5抑制劑可能具有比微管抑制劑(常引起神經(jīng)毒性)更好的特異性。至于Eg5抑制劑在胰腺癌這一惡性腫瘤中起什么作用,目前尚不清楚。
　　 本論文對Eg5基因表達(dá)調(diào)控及其抑制劑抗胰腺癌作用的分子機(jī)制進(jìn)行了研究,以加深對Eg5基因表達(dá)及

3、其功能的理解,并為Eg5抑制劑在胰腺癌治療上的應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　 在第一部分,本研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞中Eg5的表達(dá)水平受到E3泛素連接酶Parkin的負(fù)調(diào)控,Parkin不是通過泛素-蛋白酶體途徑來促進(jìn)Eg5的降解,而是通過阻止轉(zhuǎn)錄因子c-Jun與Eg5啟動(dòng)子上的AP1位點(diǎn)的結(jié)合來抑制Eg5基因的轉(zhuǎn)錄。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),Parkin使蛋白激酶JNK失活,從而導(dǎo)致c-Jun的磷酸化程度降低,而JNK的失活則依賴于Parkin對Hsp7

4、0在多個(gè)位點(diǎn)的單泛素化。Hsp70的單泛素化和隨后的JNK-c-Jun途徑的失活對于Parkin下調(diào)Eg5的表達(dá)都是十分重要的。這些結(jié)果揭示了Parkin的一個(gè)新功能,即通過Hsp70-JNK-c-Jun信號途徑調(diào)節(jié)Eg5的基因表達(dá)。
　　 在第二部分,本研究發(fā)現(xiàn)Eg5的小分子抑制劑能阻斷胰腺癌細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂,抑制胰腺癌細(xì)胞的增殖,進(jìn)而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。Eg5抑制劑所引起的有絲分裂的阻斷歸因于其對紡錘體形成的影響和對紡錘體檢