壬基酚與雙酚A對(duì)斑馬魚(yú)（Danio rerio）聯(lián)合雌激素效應(yīng)的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、華東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文壬基酚與雙酚A對(duì)斑馬魚(yú)（Daniorerio）聯(lián)合雌激素效應(yīng)的研究姓名：孫竹筠申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：動(dòng)物學(xué)指導(dǎo)教師：周忠良20050501ABSTRACTEnvironmentalestrogenshavedirectlythreatenontheexistingofwildlifeandhealthofhumanbeingsThestudyonthemechanismsandscreeningmethodso

2、fwhichhasbeenthehottopicsinenvironmentalresearchRecentlyVitelIogenin(Vtg)hasbeenstudiedextensivelyasabiomarkerforthescreeningofenvironmentalendocrinedisruptingchemicalsVitellogeninproductioncanprovideavaluablebiomarkerof

3、reproductivedisruptioninfishAbnormallyhighorlowlevelsareindicativeofdisruptionatmultiplesitesofthereproductiveendocrinesystem，orofearlysexualdevelopmentanddifferentiationIndeed，inductionofVtgisnOWthemostwidelyusedindicat

4、orforestrogenicexposureinfishThezebrafish(Danierio)，amemberofthefamilyCyprinidaeandnativetOIndiaandPakistan，has，duringthelastdecade，beenintensivelyusedasanexperimentalanimalforbiologicalandbiotechnologicalresearchInaddit

5、ion，thezebrafishisaspeciesroutinelyemployedintheOrganizationofEconomicCooperationandDevelopment(OECD)toxicitytestsTheobjectiveofthepresentstudywastodevelopahomologous，indirectcompetitiveenzymelinkedimmunosorbentassay(ELI

6、SA)forVtgandvalidateitsuseforthedetectionofestrogenicresponsesinzebrafishInordertoovercomethedifficultiesofobtainingsufficientVtgfromsuchasmallfishweuseofLvasantigeninsteadofVtgforantibodyproductionAnotherproblemnormally

7、interferingbetweensmallsizedfishandtheuseoftheELISAforVtg，istheminuteamountofplasmathatcanbewithdrawnfromthefishThus，itisoftendifficulttoachieveenoughplasmaforrepeatedorevensingleELISAmeasurementsTosolvethisproblem，theEL

8、ISAforVtgcanbebasedontheuseofthesupematantofwholebodyhomogenate(WBH)Inthiscase，onemusttakeintoaccount，thattheantizebrafishLvlgG：villrecognisebothVtgandLvTherefore，itisnecessarytOusemalefishiftheendpointisVtgTheyotkprotei

9、n，lipovitellin(Lv)waspurifiedfromovariesofmaturefemalezebrafish(Danierio)bySephacrylS300PolyclonalantibodiesagainstLvwereraisedinrabbitsAgetelectrophoresisbySDS—PAGEfollowedbyWesternblotanalysisonLvandsamplesofWBHfromunt

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