短期雌激素替代治療對中老年卵巢切除大鼠行為學(xué)及大腦白質(zhì)作用的研究.pdf

1、體視學(xué)方法研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)人大腦的萎縮主要是由于大腦白質(zhì)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維丟失所致，并且以細(xì)小直徑的有髓神經(jīng)纖維丟失為主。大量研究發(fā)現(xiàn)中老年女性在雌激素替代治療(estrogen replacement therapy，ERT)后出現(xiàn)了行為學(xué)的改善以及大腦結(jié)構(gòu)的改變，如影像學(xué)研究顯示中老年女性接受ERT后出現(xiàn)白質(zhì)體積增加。ERT如果能夠延緩大腦的衰老進(jìn)程，是否是通過保護(hù)中老年大腦白質(zhì)及白質(zhì)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維來起作用的，國內(nèi)外尚未見報道。中老年卵巢切

2、除(ovariectomized，OVX)大鼠可模擬女性絕經(jīng)后低雌激素水平的生理狀態(tài)。在給予中老年OVX大鼠為期一個月的ERT后，我們運用Morris水迷宮實驗來比較雌激素替代治療組和安慰劑治療組大鼠的行為學(xué)差異，并且運用體視學(xué)方法結(jié)合透射電鏡技術(shù)來準(zhǔn)確定量研究雌激素替代治療組大鼠大腦白質(zhì)及白質(zhì)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維的改變，建立形態(tài)學(xué)改變與行為學(xué)改變的關(guān)系。本研究運用的方法還可為將來運用該模型研究ERT對正常老年大腦白質(zhì)及神經(jīng)退行性疾病狀態(tài)下大

3、腦白質(zhì)的作用提供可靠、有效的研究手段。
　　第一部分
　　1.材料與方法
　　1.1雌性SD大鼠（10-12月齡）19只，行雙側(cè)卵巢切除術(shù)。術(shù)后1個月，隨機(jī)分為雌激素替代治療(OVX+E)組和安慰劑治療(OVX+Veh)組。OVX+E組（10只）大鼠給予持續(xù)1個月的17β-estradiol頸背部皮下注射，OVX+Veh組（9只）大鼠給予持續(xù)1個月的芝麻油頸背部皮下注射。分別在術(shù)后及ERT后進(jìn)行血清雌激素水平的檢測。尸

4、檢時檢查并測量子宮重以再次確保卵巢切除完整性及雌激素替代治療的有效性。
　　1.2在進(jìn)行ERT4周后，對OVX+ Veh組大鼠和OVX+E組大鼠進(jìn)行Morris水迷宮實驗。
　　2.結(jié)果
　　2.1 ERT后OVX+E組大鼠血清雌激素水平顯著高于卵巢切除術(shù)后大鼠的血清雌激素水平和安慰劑治療后OVX+Veh組大鼠的血清雌激素水平(P＜0.05)。且卵巢切除術(shù)后大鼠的血清雌激素水平和安慰劑治療后OVX+Veh組大鼠的血清雌

5、激素水平之間沒有顯著性差異。
　　2.2 OVX+Veh組大鼠的平均子宮重量顯著低于OVX+E組大鼠的子宮重量(P＜0.05)。
　　2.2 Morris水迷宮實驗中，OVX+E組大鼠在前5天的隱藏平臺實驗中的潛伏期明顯短于OVX+Veh組大鼠(P＜0.05);在第6天的可見平臺實驗中，兩組的潛伏期差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　第二部分
　　1.材料與方法
　　1.1行為學(xué)測試結(jié)束后，每組隨機(jī)選取5只大鼠。隨

6、機(jī)選取一側(cè)大腦半球作1mm連續(xù)切片，在解剖顯微鏡下放大10倍拍照。運用卡瓦列里原理計算大腦白質(zhì)的體積。
　　1.2在每只大鼠的連續(xù)腦片中隨機(jī)抽取5塊大腦白質(zhì)塊，做成60 nm的超薄切片，然后每張切片在透射電鏡下隨機(jī)選取8個視野放大6000倍拍照。
　　1.3 OVX+Veh組和OVX+E組大鼠大腦白質(zhì)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維的長度密度和總長度、體積密度和總體積、髓鞘的體積密度和總體積及有髓神經(jīng)纖維的平均直徑均用體視學(xué)方法分別計算。

7、r>　　2.結(jié)果
　　2.1 OVX+E組大鼠大腦白質(zhì)體積與OVX+Veh組大鼠之間的差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　2.2 OVX+E組大鼠大腦白質(zhì)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維總長度和總體積與OVX+Veh組之間的差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　2.3 OVX+E組大鼠白質(zhì)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維髓鞘的總體積與OVX+Veh組之間的差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　2.4 OVX+E組和OVX+ Ve

8、h組大鼠大腦白質(zhì)內(nèi)有髓神經(jīng)纖維的平均直徑間的差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　　2.5與OVX+Veh組大鼠比較，OVX+E組大鼠大腦白質(zhì)內(nèi)在直徑為0-1.8μm范圍內(nèi)的有髓神經(jīng)纖維總長度沒有顯著性差異(P＞0.05)。
　　全文結(jié)論
　　1本文再次證實了ERT可以改善中老年卵巢切除大鼠的空間記憶能力。
　　2本研究將透射電鏡和體視學(xué)手段相結(jié)合，準(zhǔn)確定量研究了中老年大鼠在卵巢切除后進(jìn)行1個月ERT后大腦白