雌激素替代治療對中年卵巢切除大鼠大腦白質及海馬內髓鞘及Lingo-1蛋白的影響.pdf

1、由于雌激素的缺乏，絕經后婦女認知功能下降的進程明顯加快。動物實驗和臨床研究已經證實雌激素替代治療(estrogen replacement therapy，ERT)可以改善絕經后卵巢切除后大鼠和絕經后女性的認知能力，但其機制尚不明確。髓鞘結構的異常導致的神經纖維傳導速度下降是大腦認知功能下降的重要原因之一。體視學研究發(fā)現一個月的ERT對卵巢切除大鼠的髓鞘具有保護作用。而富含亮氨酸重復序列和免疫球蛋白結構域的Nogo受體作用蛋白-1(Le

2、ucine-rich repeat and Ig domain containing NOGOreceptor interacting protein-1，Lingo-1)在抑制髓鞘形成中發(fā)揮著重要的作用，提示Lingo-1可能參與雌激素保護大腦髓鞘結構和認知功能的過程。
　　目的：
　　檢測經短期雌激素替代治療(Estrogen replacement therapy，ERT)后中年卵巢切除大鼠大腦白質及海馬內髓鞘相關的指

3、標以及Lingo-1的表達情況，探討雌激素對髓鞘作用的可能機制。
　　方法：
　　1.隨機選取24只中年(9～12月齡)雌性SD大鼠行雙側卵巢切除術(Ovariectomized,OVX)，恢復1個月后，隨機分為安慰劑治療組(OVX+Veh組，n=12)和雌激素替代治療組(OVX+E組，n=12)。OVX+E組大鼠給予持續(xù)1個月的17β-estradiol頸背部皮下注射，OVX+Veh組大鼠給予持續(xù)1個月的芝麻油頸背部皮下注

4、射。分別檢測在術后及ERT后的血清雌激素水平。
　　2.雌激素替代治療1個月后，運用Morris水迷宮檢測OVX+Veh組大鼠與OVX+E組大鼠的空間學習、記憶能力。
　　3.隨后每組大鼠隨機選取5只，運用透射電子顯微鏡觀察兩組大鼠大腦白質及海馬內髓鞘的超微結構，運用免疫組化方法檢測 Lingo-1在大腦白質及海馬的分布情況。
　　4.最后每組再隨機選取5只大鼠，運用Western blot檢測兩組大鼠大腦白質及海馬區(qū)

5、域內髓磷脂堿性蛋白(Myelin basic protein，MBP)及Lingo-1的蛋白表達水平。
　　結果：
　　1.一個月的ERT后，OVX+E組大鼠血清雌激素水平顯著高于卵巢切除術后大鼠的血清雌激素水平和安慰劑治療后OVX+Veh組大鼠的血清雌激素水平(P＜0.05)。且卵巢切除術后大鼠的血清雌激素水平和安慰劑治療后OVX+Veh組大鼠的血清雌激素水平之間沒有顯著性差異(P＞0.05)。
　　2.在第1天的可

6、見平臺實驗中，兩組大鼠的尋臺潛伏期無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。在第2-5天的定位航行實驗中，OVX+E組大鼠的逃避潛伏期明顯短于OVX+Veh組(P＜0.05)。在第6天的空間探索實驗中，兩組大鼠的游泳速度、目標象限游泳時間和目標象限游泳路程百分比均無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。
　　3.透射電鏡結果顯示，OVX+Veh組大鼠大腦白質、海馬存在顯著的髓鞘變性，而OVX+E組大鼠大腦白質及海馬內的髓鞘結構完整且致密。
　　4

7、. Western blot檢測結果顯示：OVX+E組大鼠大腦白質、海馬中MBP的含量均顯著高于OVX+Veh組(P＜0.05)。免疫組化結果顯示，與OVX+Veh組相比，OVX+E組大鼠大腦白質及海馬內的Lingo-1的分布均明顯減少
　　5.Western blot和免疫組化檢測結果顯示：OVX+E組大鼠大腦白質、海馬中Lingo-1的含量及分布均顯著低于OVX+Veh組(P＜0.05)。
　　結論：
　　為期1個