益生菌混合發(fā)酵工藝及其制劑發(fā)酵特性研究.pdf

1、隨著我國(guó)益生菌發(fā)酵業(yè)的迅猛發(fā)展，益生菌制品在消費(fèi)市場(chǎng)上所占的比重也越來(lái)越大。因此，開發(fā)高活菌數(shù)的的益生菌發(fā)酵制品已成為我國(guó)益生菌研究領(lǐng)域的最新熱點(diǎn)。本研究通過(guò)大量試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)室保存的乳球菌SD-1、乳桿菌QD與嗜鉛腸球菌JT1混合培養(yǎng)時(shí)能相互促進(jìn)生長(zhǎng)。為了進(jìn)一步提高菌株的發(fā)酵產(chǎn)量、制備風(fēng)味獨(dú)特的益生菌發(fā)酵劑，優(yōu)化了利于三株菌混合培養(yǎng)的最佳發(fā)酵工藝，同時(shí)對(duì)混合發(fā)酵液的發(fā)酵特性進(jìn)行了研究。研究?jī)?nèi)容如下：
　　1.以實(shí)驗(yàn)室保存的乳球菌

2、SD-1、乳桿菌QD、嗜鉛腸球菌JT1作為研究對(duì)象，對(duì)三株菌的混合培養(yǎng)進(jìn)行菌群構(gòu)建研究。結(jié)果顯示，用MRS培養(yǎng)基接種培養(yǎng)不同的菌株或混合菌株，最大的OD600值也不同，乳球菌SD-1、乳桿菌QD和嗜鉛腸球菌JT1混合培養(yǎng)時(shí)生物量要高于各菌株單獨(dú)培養(yǎng)時(shí)的生物量，說(shuō)明3種乳酸菌混合培養(yǎng)能相互促進(jìn)生長(zhǎng)。
　　2.對(duì)三株菌的混合發(fā)酵的培養(yǎng)基進(jìn)行了研究，采用單因素試驗(yàn)與響應(yīng)面試驗(yàn)相結(jié)合優(yōu)化了培養(yǎng)基的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽。結(jié)果顯示，最佳培養(yǎng)基組

3、分及其濃度為：蔗糖7.59g/L、大豆蛋白胨11.89g/L、酵母膏10.8g/L、磷酸氫二鈉8.23g/L。
　　3.通過(guò)對(duì)高密度發(fā)酵條件進(jìn)行了單因素與正交試驗(yàn)相結(jié)合的優(yōu)化方法，確定了最適于乳球菌SD-1、乳桿菌QD、嗜鉛腸球菌JT1混合發(fā)酵的條件為：發(fā)酵溫度37℃，初始pH為8.0，三株乳酸菌的混合接種量（v/v）為1％（種子液活菌數(shù)為3.5×106cfu/mL），搖床轉(zhuǎn)速為200r/min，發(fā)酵24h后可使活菌數(shù)達(dá)到1013

4、cfu/mL以上。
　　4.對(duì)三株菌SD-1、QD、JT1單獨(dú)培養(yǎng)及混合培養(yǎng)后通過(guò)模擬人體消化道環(huán)境，將三株菌SD-1、QD、JT1對(duì)胃液、腸液、膽鹽和高鹽環(huán)境中的耐受力進(jìn)行了比較。結(jié)果顯示，在pH值為1.5和2.5的模擬胃液中作用3h后，混合培養(yǎng)后菌體存活率分別達(dá)到了45%和80%以上，在pH值為3.5和4.5的人工胃液中，菌體存活率變化趨勢(shì)平緩；在模擬腸液中作用6h后，混合培養(yǎng)菌體存活率高達(dá)90%；在膽鹽含量不同的培養(yǎng)基中分別

5、培養(yǎng)24h后，其活菌數(shù)隨培養(yǎng)基中膽鹽質(zhì)量濃度的增加而逐步降低，當(dāng)膽鹽含量高達(dá)時(shí)3g／L，活菌數(shù)在107cfu/mL以上；在不同NaCl濃度的培養(yǎng)基中培養(yǎng)24h后，三株菌存活率隨NaCl濃度的增加而稍有降低。
　　5.通過(guò)感官評(píng)定的單因素與正交試驗(yàn)確定了發(fā)酵液風(fēng)味配方，采用高效液相色譜法分析了發(fā)酵液風(fēng)味物質(zhì)，測(cè)定了發(fā)酵期乳酸、pH值、酸度，以及貯藏期不同溫度下的活菌數(shù)。結(jié)果顯示，乳糖添加量8g/L、蜂蜜7.5g/L、低聚果糖5g/L