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文檔簡介
1、作為自然防御體系的重要組成部分,蛋白酶抑制劑是抗蟲基因工程的重要候選基因。楊樹是木本模式植物,作為多年生植物,它在進化過程中形成了非常完善和有效的防御體系。楊樹中有一系列能夠被機械損傷或者蟲害誘導的基因,它們被認為是潛在的具有抗蟲能力的基因。我們選擇了四個創(chuàng)傷可誘導基因(兩個基因來自KTI家族,其中PtdKTI5來自雜交楊Populustrichocarpa×P.deltoides,PtKTI2來自白楊Populustremuloide
2、sMichx.,脅迫蛋白PtdPOP3和能夠在莖和葉中被誘導表達的PtdWIN4來自雜交楊Populustrichocarpa×P.deltoides)檢測其抗蟲方面的能力。我們使用花絮浸泡法使四種基因由CaMV35S啟動子控制,分別在擬南芥過量表達。目的基因的整合通過基因組PCR驗證,轉錄水平通過qRT-PCR技術分析,并且通過T3后代篩選的方法得到了純合體植株。在抗蟲試驗中,對每種轉基因擬南芥類型,選取三個獨立的、具有最高表達量的轉
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