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1、新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文抗蟲基因在畢赤酵母中的表達(dá)及其在G75體系的遺傳分析姓名：周長發(fā)申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：郭三堆羅淑萍20090601Ex|ofInsectresistantG‘Pi—andGeneticxDresslon1nsectresistanteneincltlaandeneticPlAnalysisoftheGeneintheHybridCottonLinesG75AbstractPichi
2、apastoris，whichisexcellentexpressionsystem，hasbeenusedextensivelyandsuccessfullytoexpressheterologousproteinsInthisstudyW色usedsite。directedmutagenesisthroughPCRtechnologytochange冊fIrestrictionsiteinthereal“ofBtCrylAgenef
3、orfacilitatingtheconstructionofexpressionvectorThenweSUCCESSfullyconstructedsecretedrecombinantgeneexpressionvectorpPIC9KVBAandpPIC9KVBCAexpressingBtandBtCpTIproteinrespectivelyAndweobtainedtherecombinantyeastGS115／pPIC9
4、KVBAGS115／pPIC9KVBCAbyscreeningtheexpressionofBtandBtCpTIproteinsThedetectionresultsbyBtteststripandSDSPAGEdemonstratedtheyeastshadexpressedtheproteinssuccessfullyInadditionInsecticidalactivitiesshowedthatBtandBtCpTIprot
5、einsexpressingin尸ichiaaretoxicaltothebollwormsCottonhasobvioushybridadvantagesExcellenthybridcottoncanincreasetheyieldsignificantlythanconventionalcottonAtthesametime，ItCanimprovethequali曰ofthefiberandresistancetotheinse
6、ctSOitiSgreatsignificanttodevelopinsectresistanthybridcottonfortherealizationofcotton’Shighyield，stabilityhigIlemciencyInthisPaper，Wremademoleculardetectionandanalysisofagronomiccharactersinthree1inehybridcottonG75andits
7、parentTheresultswereasfollows：PCRdetectedBtgeneofthecottonG75in23lines，a11theresultswerepositive；Southernblotwasagoodresultbyoptimizingconditions，whichshowedthattheBtCrylAgeneWas34copynumbersofthehybridcottonG75，andtheir
8、parentswiththesamecopynumber；ELISAresultsshowedthatthecontentofBttoxicproteininthetopleavesofhybridcottonlinesG75exhibitdifferenceatdifferentstagesBtproteinexpressionofG75intheearlyandpostgrowthstagesWassignificantlyhigh
9、erthantheparents10werduringbudstageandbollstageTheG75ofagronomictraitsinplantheightandbranchnumberwereclosertopaternalY18performinghigherplantheightandmorefruitbranchnumberHeterobeltiosisdisplayedinbollsperplantandlintpe
10、rcentagethebothparameterWasrelatedtotheseedcottonyielddirectlyThusseedcottonproductionoftheG75increasedsignificantlytoparentsItsseedcottonyieldincreased133％thanthecontrolcottonLU15productionAlthoughHeterosisofcottonG75in
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