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文檔簡介
1、該研究將含有N末端信號肽和C末端毒性區(qū)缺失的PAP基因的表達載體pPIC9K-P用Sal Ⅰ酶切線性化后,通過電擊轉(zhuǎn)化整合P.pastorisGS115菌株細胞中.PCR篩選出利用甲醇快速型(Mut<'+>)的重組子后用雙膜免疫雜交法篩選出表達量較高的重組菌株.通過搖瓶培養(yǎng)初步摸索了誘導時間、甲醇濃度、培養(yǎng)基pH值等培養(yǎng)條件對Mut<'+>重組菌株表達PAP的影響.SDS-PAGE分析結(jié)果表明,Mut<'+>重組菌株在甲醇誘導第四天后P
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