擴(kuò)散加權(quán)成像及自噬相關(guān)蛋白表達(dá)在宮頸癌中的臨床價(jià)值研究.pdf

1、研究背景：
　　宮頸癌發(fā)病率及死亡率居全球女性惡性腫瘤的第二位，在我國則居于女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤的第一位，因此，如何采取有效措施降低宮頸癌的發(fā)病率與死亡率，已經(jīng)成為重要的社會公共健康問題。
　　細(xì)胞自噬是實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的代謝和細(xì)胞器的新舊交替，維持細(xì)胞自身穩(wěn)定的生物學(xué)過程。自噬及相關(guān)蛋白的表達(dá)情況，與多種疾病特別是惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。Beclin1是自噬體在形成過程中的一個(gè)重要蛋白，它可以促進(jìn)自噬前體的形成，調(diào)控自噬體的

2、形成和成熟過程；p62是一種選擇性自噬受體，主要參與細(xì)胞內(nèi)膜膜流、DNA修復(fù)、介導(dǎo)泛素化蛋白等自噬降解過程，是反映自噬活性的標(biāo)記性蛋白；LC-3由LC-3-Ⅰ和LC-3-II組成，主要參與自噬體的形成。由于LC-3-II的含量與自噬小泡的數(shù)量成正比，因此LC-3（主要是LC-3-II）常作為評價(jià)自噬活性的重要指標(biāo)。進(jìn)行自噬相關(guān)蛋白表達(dá)如Beclin1、p62及LC-3蛋白表達(dá)與宮頸癌的相關(guān)性研究，可以進(jìn)一步揭示宮頸癌發(fā)生和發(fā)展機(jī)制，為宮

3、頸癌的預(yù)后判斷、有效預(yù)防及尋找宮頸癌治療新靶點(diǎn)提供依據(jù)。
　　擴(kuò)散加權(quán)成像（DWI）是目前唯一能夠在體外測定活體組織內(nèi)水分子擴(kuò)散情況的影像學(xué)檢查技術(shù)，通過對宮頸癌DWI圖像表觀擴(kuò)散系數(shù)（ADC）值的定量分析，可以較為準(zhǔn)確地反映有關(guān)宮頸癌腫瘤的功能性改變，但能否用于對宮頸癌預(yù)后的預(yù)測和評價(jià)方面，尚缺乏相關(guān)的研究性證據(jù)。
　　本研究采用免疫組化方法探討自噬相關(guān)蛋白Beclin1、p62和LC-3在正常子宮頸組織、宮頸上皮內(nèi)瘤變（

4、CIN）、子宮頸鱗狀細(xì)胞癌組織中的陽性表達(dá)情況，分析上述三種蛋白與宮頸癌臨床病理因素之間的關(guān)系，以及對宮頸癌生存和預(yù)后的影響。同時(shí)利用磁共振擴(kuò)散加權(quán)成像（DWI）對不同分化程度子宮頸鱗狀細(xì)胞癌的ADC值進(jìn)行測定，探討自噬相關(guān)蛋白與功能磁共振定量參數(shù)間的關(guān)系，為宮頸癌的轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究提供新的思路和方法。
　　目的：
　　觀察Beclin1、p62及LC-3在正常子宮頸、CIN和宮頸癌中的陽性表達(dá)情況，分析上述三種自噬相關(guān)蛋白的表

5、達(dá)與宮頸癌臨床病理因素之間的關(guān)系，以及對宮頸癌生存和預(yù)后的影響。測定高、中、低分化子宮頸鱗狀細(xì)胞癌患者的ADC值并進(jìn)行分析比較，同時(shí)研究宮頸癌自噬相關(guān)蛋白表達(dá)與ADC值間的相關(guān)性。由此探討擴(kuò)散加權(quán)成像及自噬相關(guān)蛋白表達(dá)在宮頸癌中的價(jià)值。
　　材料與方法：
　　采用免疫組化SP法對宮頸癌組（子宮頸鱗狀細(xì)胞癌）標(biāo)本191例、CIN組標(biāo)本63例和正常子宮頸組標(biāo)本32例進(jìn)行 Beclin1、p62及LC-3蛋白陽性表達(dá)的標(biāo)記和半定量

6、評分比較，分析上述三種蛋白表達(dá)與患者臨床病理因素之間的關(guān)系，以及對宮頸癌組患者總生存時(shí)間和無進(jìn)展生存時(shí)間的影響。同時(shí)將宮頸癌組患者DWI影像資料后處理所得ADC值與自噬相關(guān)蛋白表達(dá)進(jìn)行分析比較。
　　結(jié)果：
　　1. Beclin1蛋白定位于細(xì)胞膜及細(xì)胞質(zhì)中，在正常子宮頸組、CIN組及宮頸癌組的陽性表達(dá)率分別為31.3％、36.5%和19.4%，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（x2=19.323，P=0.000）。Beclin1蛋白在宮頸癌

7、組陽性表達(dá)的評分值低于正常子宮頸組及CIN組（P<0.01，P<0.001），而且陽性表達(dá)與患者的年齡、腫瘤分化、FIGO分期、SCCAg值、腫瘤直徑、肌層浸潤深度、手術(shù)切緣、死亡無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P值均>0.05），與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P值均<0.05）。
　　2. p62蛋白定位于細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中，在正常子宮頸組、CIN組及宮頸癌組的陽性表達(dá)率分別為65.6%、65.1%、73.8%，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（x2=9.617，

8、P<0.01）。p62蛋白在宮頸癌組陽性表達(dá)的評分值高于正常子宮頸組與CIN組（P值均<0.01），并且陽性表達(dá)與患者的年齡、腫瘤分化、FIGO分期、腫瘤直徑、肌層浸潤深度、手術(shù)切緣、死亡無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P值均>0.05），與SCCAg值、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P值均<0.05）。
　　3. LC-3蛋白定位于細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中，在正常子宮頸組、CIN組及宮頸癌組的陽性表達(dá)率分別為84.4%、73.0%、50.3%，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)

9、差異（x2=36.291，P=0.000）。LC-3蛋白在宮頸癌組陽性表達(dá)的評分值低于正常子宮頸組及CIN組（P<0.001，P<0.01），而且與患者的年齡、FIGO分期、SCCAg值、腫瘤直徑、手術(shù)切緣、死亡無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P值均>0.05），與腫瘤分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肌層浸潤深度及復(fù)發(fā)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P值均<0.05）。
　　4.腫瘤分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、LC-3表達(dá)是影響總生存時(shí)間的危險(xiǎn)因素（P值均<0.05），年齡、FIGO分期、

10、SCCAg值、腫瘤直徑、肌層浸潤深度、手術(shù)切緣、Beclin1表達(dá)和p62表達(dá)與總生存時(shí)間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P值均>0.05）；SCCAg值、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Beclin1表達(dá)、p62表達(dá)和LC-3表達(dá)是影響宮頸癌組患者無進(jìn)展生存時(shí)間的危險(xiǎn)因素（P值均<0.05）；年齡、腫瘤分化、FIGO分期、腫瘤直徑、肌層浸潤深度和手術(shù)切緣與無進(jìn)展生存時(shí)間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P值均>0.05）。
　　5.宮頸癌組患者中高分化宮頸癌患者的平均 ADC值>中分化

11、宮頸癌患者的平均ADC值>低分化宮頸癌患者的平均ADC值（P<0.05）。
　　6.在宮頸癌組中，高分化患者的LC-3陽性表達(dá)與ADC值無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，中、低分化患者中LC-3陽性表達(dá)與ADC值間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1. Beclin1蛋白在子宮頸鱗狀細(xì)胞癌組織中呈現(xiàn)低表達(dá)，與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，且是影響無進(jìn)展生存時(shí)間的危險(xiǎn)因素，說明Beclin1蛋白可能與宮頸癌的發(fā)生及發(fā)展

12、密切相關(guān)。
　　2. p62蛋白在子宮頸鱗狀細(xì)胞癌組織中呈現(xiàn)高表達(dá)，與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、SCCAg值和腫瘤的復(fù)發(fā)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，且是影響無進(jìn)展生存時(shí)間的危險(xiǎn)因素，說明p62蛋白可能與宮頸癌的發(fā)展及預(yù)后相關(guān)。
　　3. LC-3蛋白在子宮頸鱗狀細(xì)胞癌組織中呈現(xiàn)低表達(dá)，與腫瘤的分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肌層浸潤深度和復(fù)發(fā)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，且是影響總生存時(shí)間及無進(jìn)展生存時(shí)間的危險(xiǎn)因素，說明LC-3蛋白與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān)。