參麥注射液及其有效成分對藥物代謝酶的影響.pdf

1、細胞色素P450是重要的Ⅰ相藥物代謝酶系統(tǒng)，參與一系列親脂性化合物的代謝，包括藥物、致癌物及環(huán)境污染物的代謝轉(zhuǎn)化。參麥注射液通過對肝臟P450酶的誘導(dǎo)或抑制可與其他藥物產(chǎn)生相互作用。同時參麥注射液對心臟P450酶的調(diào)節(jié)作用，有助于發(fā)現(xiàn)其心血管治療作用新的途徑或靶點。
　　本課題首先研究了參麥注射液對大鼠肝臟細胞色素P450酶的影響，采用超速離心法制備大鼠的肝微粒體，與探針藥物共孵育，應(yīng)用液相色譜-質(zhì)譜(LC/MS)測定各同工酶特異

2、性底物在大鼠肝微粒體的代謝產(chǎn)物的生成量，以此來測定各同工酶的酶活性。應(yīng)用RT-PCR方法，檢測參麥注射液對藥物代謝酶mRNA表達的影響。結(jié)果顯示:參麥注射液可增加CYP286、2C9酶活性，對CYP1A2、3A酶活性無明顯影響;紅參注射液對CYP1A2、286和2C9酶活性具有明顯誘導(dǎo)作用，對CYP3A酶活性無影響;麥冬注射液能誘導(dǎo)CYP2C9酶活性。各處理組mRNA水平變化顯示，參麥注射液能誘導(dǎo)CYP1A2、2B、2C的表達，紅參注射

3、液和麥冬注射液能誘導(dǎo)CYP2C的表達，紅參注射液對CYP3A的表達無影響。參麥注射液對大鼠CYP2B、2C的誘導(dǎo)作用在酶活性水平和mRNA轉(zhuǎn)錄水平具有一致性，紅參注射液對CYP3A在酶活性和mRNA水平都體現(xiàn)出抑制的趨勢，麥冬注射液對CYP2C的誘導(dǎo)作用在酶活性及mRNA水平也均有體現(xiàn)。參麥注射液及其各單藥對CYP450同工酶不同程度的誘導(dǎo)或抑制作用，提示當藥物聯(lián)合應(yīng)用時應(yīng)關(guān)注可能產(chǎn)生的藥物間相互作用。
　　參麥注射液對心臟組織P

4、450酶mRNA表達水平檢測顯示:與空白組比較，除CYP281、CYP4A3和CYP4F6，參麥注射液對其他CYP各亞型mRNA的表達均表現(xiàn)了上調(diào)的作用，紅參注射液組對CYP2E1、 CYP4A3、 CYP4F1和 EHPX2 mRNA表達有上調(diào)作用，麥冬注射液對ANP、BNP和EHPX2 mRNA的表達上調(diào)作用明顯，同時能顯著下調(diào)CYP281和CYP2C11的表達。雖然參麥注射液對CYP281的作用沒有統(tǒng)計學(xué)意義，但總體呈現(xiàn)出誘導(dǎo)的趨

5、勢，而麥冬注射液對CYP2B1呈現(xiàn)顯著的抑制作用，提示紅參注射液對CYP281的誘導(dǎo)作用更強。參麥注射液、紅參注射液與麥冬注射液均對CYP2E1、CYP4F1和EHPX2有誘導(dǎo)作用，提示參麥注射液對CYP2E1、CYP4F1和EHPX2的誘導(dǎo)作用可能由復(fù)方中的紅參和麥冬共同貢獻。參麥注射液和麥冬注射液對ANP和BNP均具有誘導(dǎo)的作用，提示在對ANP和BNP的作用中麥冬比紅參的作用更強。同時參麥注射液對心血管疾病療效明確，可能與其對CYP

6、2J3、ANP和BNP等調(diào)節(jié)作用較強相關(guān)。細胞實驗水平得到了進一步的進一步的驗證，參麥注射液對大鼠H9c2心肌細胞的CYP2J3、CYP2C11、ANP和BNP均具有明顯的誘導(dǎo)趨勢。
　　為了更加全面的研究參麥注射液對P450酶的影響，選取麥冬中的有效成分麥冬皂苷D，并以執(zhí)行心臟P450酶系統(tǒng)中執(zhí)行重要生理功能的CYP2J3進行進一步研究。考察麥冬皂苷D對大鼠H9c2心肌細胞CYP2J3的影響，分別檢測麥冬皂苷D作用細胞后CYP2

7、J3mRNA、蛋白水平以及下游產(chǎn)物14-15EETs變化。結(jié)果顯示:在，麥冬皂苷D對CYP2J3 mRNA表達和蛋白表達均有明顯的上調(diào)作用并呈現(xiàn)濃度依賴性(P＜0.05)，。ELISA實驗檢測顯示麥冬皂苷D能增加大鼠H9c2心肌細胞中EETs的含量，提示麥冬皂苷D可能通過上調(diào)CYP2J3使心肌細胞中EETs的含量增加。
　　綜上所述，參麥注射液對大鼠肝臟、心臟CYP450酶各亞型顯示了誘導(dǎo)或抑制的作用，當臨床需要與其他藥物聯(lián)合應(yīng)用