復(fù)方一把針有效部位的制備及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、高血壓腎病系原發(fā)性高血壓引起的良性小動脈。腎硬化(高血壓腎小動脈硬化)和惡性小動脈腎硬化,并伴有相應(yīng)臨床表現(xiàn)的疾病。為高血壓主要并發(fā)癥之一,發(fā)生率為42％,僅次于心臟并發(fā)癥,危害巨大。目前治療高血壓腎病的化學(xué)藥物長期使用易導(dǎo)致不良反應(yīng)和耐受性,且禁忌癥多,具有一定局限性。
　　 復(fù)方一把針方為江蘇省名中醫(yī)唐蜀華教授的經(jīng)驗方,由酒萸肉、制何首烏、鬼針草組成,對高血壓腎病有很好的治療作用。本課題對復(fù)方一把針有效部位的篩選、提取、分離

2、純化、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了研究,為該復(fù)方有效部位制劑的研制開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。
　　 主要研究內(nèi)容包括:
　　 1.有效部位的確定
　　 通過文獻(xiàn)及藥效研究確定了酒萸肉、制何首烏、鬼針草治療高血壓腎病的有效部位,主要為環(huán)烯醚萜苷、二苯乙烯苷、總黃酮類成分。
　　 2.復(fù)方一把針中各飲片含量測定研究
　　 (1)分別建立了馬錢苷和莫諾苷、二苯乙烯苷、總黃酮含量測定方法。
　　 (2)對方中各飲片有效成

3、分的含量進(jìn)行了測定,暫定酒萸肉、制何首烏、鬼針草飲片中馬錢苷、莫諾苷、二苯乙烯苷、總黃酮含量范圍分別為0.50％～0.90％、0.90％～1.60％、0.90％～2.00％、2.50％～4.50％。
　　 3.有效部位制備工藝研究
　　 (1)以馬錢苷和莫諾苷轉(zhuǎn)移率(含量)為指標(biāo),對酒萸肉中環(huán)烯醚萜苷的提取、分離純化、干燥工藝進(jìn)行了研究,確定了酒萸肉環(huán)烯醚萜苷有效部位制備工藝條件:酒萸肉飲片加10倍量水,煎煮3次,每次8

4、0min,提取液濃縮至相對密度為1.20(60℃測定),放冷至室溫,邊攪拌邊緩緩加入95％乙醇至含醇量達(dá)60％,靜置過夜,濾過,濾液回收乙醇至無醇味后加水稀釋至0.5g/mL,按樹脂與生藥量重量比為1:0.75加入上樣液,2BV/h的速度上D101大孔樹脂柱,上樣后水洗脫5BV,再用15％乙醇溶液洗脫9BV,回收乙醇并濃縮至相對密度為1.05～1.15(60℃測定),60℃真空干燥。
　　 (2)以二苯乙烯苷轉(zhuǎn)移率為指標(biāo),對制何

5、首烏中二苯乙烯苷的提取、純化工藝進(jìn)行了研究,確定了二苯乙烯苷有效部位的制備工藝條件:制何首烏飲片加8倍量水,煎煮3次,每次75min,提取液合并后80℃減壓濃縮至相對密度為1.10(60℃測定),加1倍提取液體積的乙酸乙酯萃取4次。
　　 (3)以總黃酮含量為指標(biāo),對鬼針草總黃酮的提取、純化工藝進(jìn)行了研究,確定了鬼針草總黃酮有效部位制備工藝條件:鬼針草飲片加13倍70％醇提取3次,每次1h,濾液合并,回收乙醇至無醇味,得鬼針草提

6、取液,提取液稀釋至0.5g/mL,按樹脂與藥材重量比為1:0.5、3BV/h的速度上D101大孔樹脂柱,上樣后水洗脫6BV,再用50％7,醇溶液洗脫9BV,回收乙醇后80℃真空干燥。
　　 (4)對各有效部位的制備分別進(jìn)行了中試研究,結(jié)果表明,所篩選的工藝穩(wěn)定可行,可用于工業(yè)生產(chǎn)。
　　 4.有效部位質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究
　　 (1)采用薄層色譜法,分別建立了酒萸肉環(huán)烯醚萜苷、制何首烏二苯乙烯苷、鬼針草總黃酮有效部位及鬼

7、針草飲片薄層鑒別方法。
　　 (2)采用高效液相色譜法,測定了酒萸肉環(huán)烯醚萜苷有效部位中馬錢苷、莫諾苷含量,暫定馬錢苷、莫諾苷總量不得少于50.0％;測定了制何首烏二苯乙烯苷有效部位中二苯乙烯苷含量,暫定二苯乙烯苷含量不得少于55.0％;采用比色法測定了總黃酮有效部位中總黃酮含量,暫定總黃酮有效部位中總黃酮含量以蘆丁計不得少于50.0％。
　　 (3)對各有效部位的水分、熾灼殘渣、重金屬含量及二苯乙烯苷有效部位的乙酸乙酯