青黛提取物對HEL細(xì)胞增殖、凋亡和分化的影響.pdf

1、目的：研究青黛有效成分在體外對HEL(humanerythroleukemia)細(xì)胞的增殖、凋亡和分化的作用；
　　 方法：1．青黛有效成分提?。翰捎么继岱ㄌ崛∏圜煊行С煞?，溶解于二甲亞砜配制初始濃度為10mg/mL。2．細(xì)胞培養(yǎng)：HEL細(xì)胞用含10％小牛血清的RPMI1640液體培養(yǎng)基37C，5％CO2常規(guī)培養(yǎng)。3.MTT還原實驗：取生長狀態(tài)良好的HEL細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞密度為0.5×106～1×106/mL，與不同濃度青黛提取物

2、藥液混合培養(yǎng)，觀察青黛有效成分對HEL細(xì)胞的增殖抑制效應(yīng)。4．光學(xué)顯微鏡下觀察青黛有效成分作用前后HEL細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變；5．凋亡檢測：流式細(xì)胞術(shù)AnnexinV-FITC/PI雙標(biāo)記法檢測青黛有效成分對HEL細(xì)胞的早期凋亡誘導(dǎo)作用。6．細(xì)胞分化檢測：流式細(xì)胞術(shù)檢測HEL細(xì)胞CD14和CD11b的表達(dá)情況，觀察HEL細(xì)胞單核系分化趨勢；
　　 結(jié)果：1.MTT結(jié)果顯示25，50，75及100μg/mL藥物對HEL細(xì)胞的生長抑制率

3、分別為16.01％，39.12％，50.06％和59.28％(P均＜0.01)；2．光學(xué)顯微鏡下觀察青黛有效成分作用后，部分HEL細(xì)胞的形態(tài)呈凋亡改變；3．青黛有效成分可誘導(dǎo)HEL細(xì)胞早期凋亡：25，50，75及100μg/mL藥物對應(yīng)的HEL早期凋亡率分別是5.60％，13.7％，17.8％和18.4％，明顯高于對照細(xì)胞的自發(fā)凋亡率(2.70％)；4．與陰性對照組相比25，50，75和100μg/mL青黛有效成分作用下HEL細(xì)胞均出現(xiàn)