水龍骨乙醇提取物對(duì)人宮頸癌Hela細(xì)胞增殖及凋亡的影響.pdf

1、目的:
　　本研究旨在探討中藥水龍骨(Rhizoma Polypodiodis Nipponicae，RPN)對(duì)人宮頸癌HeLa細(xì)胞及裸鼠移植瘤的增殖抑制作用及其機(jī)制。
　　材料和方法:
　　采用四甲基偶氮唑鹽(MTS)法測(cè)定水龍骨75％乙醇提取物（以下簡(jiǎn)稱水龍骨）對(duì)HeLa細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用;鏡下觀察水龍骨處理HeLa細(xì)胞后發(fā)生凋亡的形態(tài)變化;流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)水龍骨處理HeLa細(xì)胞后誘導(dǎo)凋亡作用及凋亡率;將2

2、×106個(gè)HeLa細(xì)胞接種于裸鼠左腋窩皮下，建立人宮頸癌裸鼠皮下移植瘤模型，隨機(jī)分為水龍骨(10vl/ml)治療組及溶劑組（對(duì)照組），每組5只，每天腹腔注射給藥14d，停藥24h后處死裸鼠，測(cè)量荷人宮頸癌裸鼠體重，移植瘤瘤體積、瘤重，計(jì)算抑瘤率。
　　結(jié)果:
　　MTS分析表明，水龍骨抑制HeLa細(xì)胞增殖，并呈時(shí)間和劑量依賴性(P＜0.01):8vl/ml濃度下，其12、24、36、48h的增殖率分別為57.8％、50.7％

3、、47.7％、23.1％，在作用48h，濃度為2vl/ml、4vl/ml、8vl/ml濃度的增殖率分別為86.6％、84.3％、20.O％;水龍骨處理HeLa細(xì)胞后，鏡下觀察出現(xiàn)典型的凋亡特征;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Annexin-V/PI雙染出現(xiàn)凋亡細(xì)胞，2vl/ml、4vl/ml、8vl/ml組凋亡率為(23.37±1.25)％、（50.2±1.30）％、（55.7±2.95）％，凋亡率與對(duì)照組比較，有顯著差異(P＜0.01)。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)方面

4、，與對(duì)照組相比，水龍骨處理組明顯抑制移植瘤的生長(zhǎng)，其抑瘤率為54.7％，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。
　　結(jié)論:
　　水龍骨乙醇提取物可顯著抑制人宮頸癌Hela細(xì)胞生長(zhǎng)，細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率呈時(shí)間—濃度依賴性;水龍骨乙醇提取物可明顯誘導(dǎo)Hela細(xì)胞凋亡，隨著濃度的增加，凋亡率明顯增加;水龍骨對(duì)宮頸癌HeLa細(xì)胞裸鼠移植瘤有明顯的抑制作用。因此從中藥中尋找具有抗宮頸癌作用的新藥是本文的宗旨。實(shí)驗(yàn)證明水龍骨不失為一種很有前途的