姜黃素抑制人宮頸癌HeLa細(xì)胞增殖相關(guān)作用機(jī)制研究.pdf

1、目的：通過(guò)觀察姜黃素對(duì)體外培養(yǎng)人宮頸癌HeLa細(xì)胞增殖的抑制及誘導(dǎo)凋亡作用，初步探討姜黃素抑制宮頸癌細(xì)胞生長(zhǎng)的可能機(jī)制，為姜黃素臨床治療宮頸癌提供實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。
　　方法：人宮頸癌細(xì)胞株HeLa細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)于含10％胎牛血清、100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素的DMEM培養(yǎng)液中，在37℃、5％CO2及飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。MTT法檢測(cè)不同濃度(0、10、20、30、40、50μmol/L)姜黃素處理12、24、48h后

2、對(duì)HeLa細(xì)胞的抑制率;倒置顯微鏡技術(shù)觀察細(xì)胞形態(tài);選取姜黃素作用24h的Hela細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn);RT-PCR檢測(cè)PTENmRNA以及p53mRNA表達(dá);Western blot法檢測(cè)PTEN、p53、AKT蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：(1)MTT實(shí)驗(yàn)顯示姜黃素對(duì)宮頸癌HeLa細(xì)胞的生長(zhǎng)具有明顯抑制作用，且呈劑量依賴性（r=0.847，P＜0.05）和時(shí)間依賴性(r=0.516,P＜0.05)。(2)倒置顯微鏡下觀察可見(jiàn)，對(duì)照組細(xì)胞生

3、長(zhǎng)狀態(tài)良好，隨著藥物濃度的增加，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞形態(tài)逐漸變圓、胞質(zhì)回縮加劇、漂浮細(xì)胞逐漸增多。(3) RT-PCR結(jié)果顯示姜黃素作用24h后的Hela細(xì)胞中，隨著姜黃素濃度的增加，PTENmRNA的表達(dá)增加，p53mRNA的表達(dá)增加，對(duì)照組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），試驗(yàn)組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05); p53mRNA與PTENmRNA的表達(dá)有著顯著正相關(guān)(r=0.920，P＜0.01)。(4) Western b

4、lot法顯示姜黃素作用24h后的Hela細(xì)胞中，隨著姜黃素濃度的增加，PTEN蛋白表達(dá)增多，p53蛋白的表達(dá)增多，AKT蛋白表達(dá)減少表達(dá)，與對(duì)照組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），實(shí)驗(yàn)組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05); PTEN與p53的蛋白表達(dá)呈顯著正相關(guān)(r=0.993，P＜0.01);PTEN與AKT的蛋白表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.978，P＜0.01)。
　　結(jié)論：姜黃素能抑制體外培養(yǎng)的人富頸癌HeL