姜黃素抑制人宮頸癌HeLa細胞增殖相關作用機制研究.pdf

1、目的：通過觀察姜黃素對體外培養(yǎng)人宮頸癌HeLa細胞增殖的抑制及誘導凋亡作用，初步探討姜黃素抑制宮頸癌細胞生長的可能機制，為姜黃素臨床治療宮頸癌提供實驗和理論依據。
　　方法：人宮頸癌細胞株HeLa細胞常規(guī)培養(yǎng)于含10％胎牛血清、100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素的DMEM培養(yǎng)液中，在37℃、5％CO2及飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。MTT法檢測不同濃度(0、10、20、30、40、50μmol/L)姜黃素處理12、24、48h后

2、對HeLa細胞的抑制率;倒置顯微鏡技術觀察細胞形態(tài);選取姜黃素作用24h的Hela細胞進行后續(xù)試驗;RT-PCR檢測PTENmRNA以及p53mRNA表達;Western blot法檢測PTEN、p53、AKT蛋白表達。
　　結果：(1)MTT實驗顯示姜黃素對宮頸癌HeLa細胞的生長具有明顯抑制作用，且呈劑量依賴性（r=0.847，P＜0.05）和時間依賴性(r=0.516,P＜0.05)。(2)倒置顯微鏡下觀察可見，對照組細胞生

3、長狀態(tài)良好，隨著藥物濃度的增加，實驗組細胞形態(tài)逐漸變圓、胞質回縮加劇、漂浮細胞逐漸增多。(3) RT-PCR結果顯示姜黃素作用24h后的Hela細胞中，隨著姜黃素濃度的增加，PTENmRNA的表達增加，p53mRNA的表達增加，對照組相比差異均有統計學意義（P＜0.05），試驗組間兩兩比較差異均有統計學意義(P＜0.05); p53mRNA與PTENmRNA的表達有著顯著正相關(r=0.920，P＜0.01)。(4) Western b

4、lot法顯示姜黃素作用24h后的Hela細胞中，隨著姜黃素濃度的增加，PTEN蛋白表達增多，p53蛋白的表達增多，AKT蛋白表達減少表達，與對照組相比差異均有統計學意義（P＜0.05），實驗組間兩兩比較差異均有統計學意義(P＜0.05); PTEN與p53的蛋白表達呈顯著正相關(r=0.993，P＜0.01);PTEN與AKT的蛋白表達呈顯著負相關(r=-0.978，P＜0.01)。
　　結論：姜黃素能抑制體外培養(yǎng)的人富頸癌HeL