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文檔簡介
1、[目的]觀察不同濃度黃芩素干預宮頸癌Hela細胞后,細胞周期、細胞遷移、細胞培養(yǎng)基中基質(zhì)金屬蛋白酶2(matrix metalloproteinase2,MMP2)、基質(zhì)金屬蛋白酶9(matrix metalloproteinase,MMP9)活性的變化,以及MMP2、MMP9、基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase2,TIMP2)、細胞周期蛋白D1(CyclinD1)mR
2、NA和蛋白表達水平的變化。
[方法]體外培養(yǎng)宮頸癌Hela細胞,分空白對照(Control)組、(50,100,200,300)μmol/L干預組,培養(yǎng)(12,24,48)h。相差顯微鏡下觀察細胞形態(tài)及數(shù)量的變化;流式細胞技術(shù)法檢測細胞周期的變化;細胞遷移實驗觀察細胞遷移的改變;明膠酶譜法檢測細胞培養(yǎng)基中的MMP2、MMP9活性變化;RT-PCR檢測MMP2、MMP9、TIMP2、CyclinDl mRNA表達水平的變化;We
3、stern Blot檢測MMP2、MMP9、TIMP2、CyclinD1蛋白表達水平的變化。
[結(jié)果]黃芩素干預24小時后,與空白對照組相比較,各黃芩素干預組的細胞G1期均受阻滯,阻滯程度與黃芩素干預濃度成正向變化;黃芩素能有效抑制Hela細胞的遷移,遷移距離與黃芩素干預濃度成反向變化;細胞培養(yǎng)基中MMP2及MMP9的活性受抑制,抑制程度與黃芩素干預濃度成正向變化;MMP2、MMP9、CyclinD1 mRNA及蛋白表達隨黃芩
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