腱組織提取物對大鼠脂肪來源間充質(zhì)干細胞增殖和向肌腱細胞分化的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、研究目的:
　　 探討腱組織提取物對ADSC增殖和向肌腱細胞方向分化的影響，從而為肌腱組織工程及其最終應(yīng)用于臨床提供理論依據(jù)。
　　 研究方法:
　　 從3周齡SD大鼠腹股溝脂肪墊分離出脂肪組織，通過Ⅰ型膠原酶消化法分離干細胞，接種于含有胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基中分離傳代。每日以倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)及生長情況，MTT法繪制ADSC生長曲線。經(jīng)鑒定后，取第三代ADSC分成實驗組和對照組2組，利用腱組織提取物處理實

2、驗組ADSC，Hank’s液處理對照組細胞后繼續(xù)培養(yǎng)觀察。采用MTT比色法進行增殖活性比較，Ⅰ型膠原免疫細胞化學染色檢測成肌腱分化情況以及RT-PCR檢測肌腱發(fā)育相關(guān)基因(CollagenⅠ、CollagenⅢ基因)的表達。
　　 研究結(jié)果:
　　 原代細胞接種4-6小時后即可見沉降貼壁，7-8天左右可見大量增殖，按一定方向性排列，呈漩渦狀或束狀，傳代后細胞增殖迅速，生長穩(wěn)定。腱組織提取物誘導后，MTT實驗顯示ADSC增

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