bFGF對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向睪丸間質(zhì)細(xì)胞分化的作用研究.pdf

1、目的：
　　通過研究bFGF在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（ BMSCs）定向分化為睪丸間質(zhì)細(xì)胞(Leydigs)過程中的作用，探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）定向分化為睪丸間質(zhì)細(xì)胞(Leydigs)的適宜方法。
　　方法：
　　通過全骨髓貼壁法獲得大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，將經(jīng)純化鑒定的BMSCs第3代細(xì)胞接種于六孔板，隨機(jī)分為普通培養(yǎng)基對(duì)照組（A）、HCG+PDGF誘導(dǎo)組(B）、HCG+PDGF+5.0ng/ml bFGF誘導(dǎo)組

2、(C）、HCG+PDGF+10.0ng/ml bFGF誘導(dǎo)組（D）、HCG+PDGF+20.0ng/ml bFGF誘導(dǎo)組（E），每組設(shè)3個(gè)復(fù)孔進(jìn)行誘導(dǎo)，分別于第7天、14天、21天進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察、培養(yǎng)液睪酮水平及3β-羥化類固醇脫氫酶(3β-HSD)免疫熒光表達(dá)的陽性細(xì)胞數(shù)及其比例進(jìn)行檢測(cè)。
　　結(jié)果：
　　1）B、C、D、E組細(xì)胞誘導(dǎo)后，光學(xué)顯微鏡下細(xì)胞體積變大，細(xì)胞間互相連接呈長(zhǎng)梭形或不規(guī)則形，貼壁生長(zhǎng)，細(xì)胞核大，較圓，

3、符合Leydig細(xì)胞的特點(diǎn)。2）隨著誘導(dǎo)時(shí)間的增加、隨著bFGF濃度的增加，B、C、D、E組睪酮水平逐漸升高，免疫熒光檢測(cè)3β-HSD陽性表達(dá)細(xì)胞逐漸增多。其中：C、D、E組與B組，D、E組與C組間結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；D、E組之間結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。誘導(dǎo)過程A組細(xì)胞培養(yǎng)液中未檢測(cè)到睪酮，免疫熒光檢測(cè)未見3β-HSD陽性細(xì)胞。
　　結(jié)論：
　　1）bFGF在大鼠BMSC細(xì)胞向Leydig細(xì)胞