農(nóng)桿菌介導(dǎo)抗蟲（CpTI）基因的花生遺傳轉(zhuǎn)化與轉(zhuǎn)基因植株的再生.pdf

1、山東大學(xué)碩士學(xué)位論文農(nóng)桿菌介導(dǎo)抗蟲（CpTI）基因的花生遺傳轉(zhuǎn)化與轉(zhuǎn)基因植株的再生姓名：徐平麗申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：植物學(xué)指導(dǎo)教師：張舉仁2001.10.30出丕丕芏塑主堂焦迨塞農(nóng)桿菌介導(dǎo)抗蟲(CpTI)基因的花生遺傳轉(zhuǎn)化與轉(zhuǎn)基因植株的再生時(shí)，移至生根培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根，以添加2Omg／LNAA的誘導(dǎo)根的效果最好，卡那霉素濃度調(diào)至50mg／L。整個(gè)培養(yǎng)過程始終保持羧芐青霉素的濃度不變，卡那霉素的濃度逐步降低，之后將生長健壯、的再生植株移

2、栽至溫室礦采用CTAB法提取再生植株葉片的植物總DNA，以目的基因兩端——————～●序列為引物，進(jìn)行再生植株總DNA的PCR檢測。偌果表明，所得到＼、的25株再生植株(以魯花13為例)在PCR檢測中24株為陽性，說明CpTI基因應(yīng)已整合到花生基因組中，同時(shí)也說明實(shí)驗(yàn)中篩選劑的篩選壓力還是很有效的。以32P標(biāo)記的目的基因PCR產(chǎn)物為探針，選取八株P(guān)CR陽性反應(yīng)的植株進(jìn)行總DNA的Southern雜交檢測，其中六株出現(xiàn)特異目標(biāo)帶。為進(jìn)一步