疏肝和胃湯治療肝郁脾虛證功能性消化不良有效部位的篩選.pdf

1、目的:
　　通過(guò)探討舒肝和胃湯不同部位的提取物對(duì)肝郁脾虛證功能性消化不良大鼠的體重、胃腸動(dòng)力以及血清遞質(zhì)、胃竇蛋白的表達(dá)情況，篩選出疏肝和胃湯治療肝郁脾虛證功能性消化不良大鼠的較優(yōu)有效部位提取物。
　　方法:
　　提取出疏肝和胃湯水煎液的石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、余液部位。用夾尾刺激+飲食不規(guī)律+飲酸綜合法造肝郁脾虛證功能性消化不良動(dòng)物模型;用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定治療后大鼠血清中的血清遞質(zhì)CCK

2、、GAS、MTL、AChE、SP、5-HT、ET-1、NO的含量;用蛋白印記法（Western Blot法）測(cè)定大鼠胃竇Ghrelin蛋白;用免疫組化法測(cè)定5-HT蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1.疏肝和胃湯各提取部位對(duì)肝郁脾虛證功能性消化不良大鼠胃腸動(dòng)力的影響。
　　胃內(nèi)殘存率:①正常對(duì)照組、正丁醇組、乙酸乙酯組、原液組、莫沙必利組和模型組、余液組比較(P＜0.01);正丁醇組和正常組比較(P＜0.05);②正丁醇組

3、、乙酸乙酯組、原液組和莫沙必利組比較(P＞0.05)。小腸推進(jìn)率:①正常對(duì)照組、正丁醇組、乙酸乙酯組、原液組、莫沙必利組和模型組、余液組比較(P＜0.01);②正丁醇組和正常組比較(P＜0.05);正丁醇組、乙酸乙酯組、原液組和莫沙必利組比較(P＞0.05)。
　　2.疏肝和胃湯正丁醇部位、乙酸乙酯部位對(duì)功能性消化不良大鼠的影響:
　　(1)體重:給藥結(jié)束后，(Ⅰ)組大鼠體重和Ⅵ組比較(P＜0.01)，(Ⅱ)和(Ⅵ)比較(P

4、＜0.01)，Ⅳ和Ⅵ比較(P＜0.05)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　(2)胃腸動(dòng)力:與Ⅰ比較，Ⅵ組的胃內(nèi)殘存率較高(P＜0.05)。Ⅵ組小腸推進(jìn)率較低(P＜0.01)，與Ⅲ組比較(P＜0.05)，和本實(shí)驗(yàn)中的其他組比較(P＞0.05)，均無(wú)顯著性差異;與Ⅵ組比較，Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ組的胃內(nèi)殘存率明顯較低(P＜0.01)，Ⅲ組的胃內(nèi)殘存率也比Ⅰ組的低(P＜0.05)，Ⅱ組的小腸推進(jìn)率明顯比Ⅵ組的高(P＜0.05)，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組的小腸推進(jìn)率和

5、Ⅵ組的比較均無(wú)顯著性差異;與Ⅱ比較，Ⅲ組的胃內(nèi)殘存率較高(P＜0.05)，小腸推進(jìn)率明顯要低(P＜0.05)，Ⅱ組和Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ組比較，胃內(nèi)殘存率和小腸推進(jìn)率均無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。
　　(3)血清遞質(zhì):CCK:正丁醇組與乙酸乙酯組、原液組，模型對(duì)照組比較有顯著性差異(P＜0.01)，正丁醇組與正常對(duì)照組和莫沙必利組比較均無(wú)顯著性差異。GAS:正常組和乙酸乙酯組有顯著性差異(P＜0.01)，正丁醇組與正常組和莫沙必利組比較均

6、無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。MTL:莫沙必利組和正丁醇組比較(P＞0.05);乙酸乙酯組和正丁醇組比較(P＜0.01)。AChE:正丁醇組和莫沙必利組比較(P＞0.05)。原液組和正丁醇組比較(P＜0.05)。
　　(4)Ghrelin蛋白、5-HT蛋白的表達(dá):Ghrelin蛋白的表達(dá)，正丁醇組和莫沙必利組的條帶顏色最深，原液組的顏色次之，乙酸乙酯組和模型對(duì)照組的顏色均比正常組的淺。5-HT蛋白的表達(dá)，正常組、正丁醇組、莫沙必利

7、組表達(dá)率明顯高于模型對(duì)照組和乙酸乙酯組。
　　3.不同濃度疏肝和胃湯正丁醇部位提取物對(duì)肝郁脾虛證功能性消化不良的影響:
　　(1)體重:，正丁醇低濃度組(M3組)，模型對(duì)照組(M1組)和正常對(duì)照組(Z組)比較(P＜0.01)，有顯著性差異。正丁醇低濃度組(M3組)，模型對(duì)照組（M1組）和莫沙必利組（M2組）比較(P＜0.01)。莫沙必利組（M2組），正丁醇中濃度組(M4組)，正丁醇高濃度組(M5組)和正常對(duì)照組（Z組）比較(

8、P＞0.01)，沒(méi)有顯著性差異。
　　(2)胃腸動(dòng)力:胃內(nèi)殘存率:莫沙必利組(M2組)與正丁醇低濃度組(M3組)，正丁醇中濃度組(M4組)比較((P＜0.05)，有顯著性差異;與正丁醇高濃度組(M5組)比較(P＞0.01)，沒(méi)有顯著性差異。正丁醇低濃度組(M3組)，正丁醇中濃度組(M4組)與正丁醇高濃度組(M5組)比較(P＞0.05)，頭顯著性差異。各組大鼠小腸推進(jìn)率比較:正丁醇低濃度組(M3組)，正丁醇中濃度組(M4組)與莫沙必

9、利組（M2組）比較(P＜0.05)，沒(méi)有顯著性差異，促進(jìn)小腸推進(jìn)效果比莫沙必利差;正丁醇高濃度組(M5組)與莫沙必利組（M2組）比較(P＜0.01)，有顯著性差異的，促進(jìn)小腸推進(jìn)的效果比莫沙必利好。正丁醇低濃度組(M3組)，正丁醇中濃度組(M4組)與正丁醇高濃度組(M5組)比較(P＜0.01)，有顯著性差異。正丁醇低濃度組(M3組)，正丁醇中濃度組(M4組)促進(jìn)小腸推進(jìn)的效果比正丁醇高濃度組(M5組)差。
　　(3)血清遞質(zhì):各組

10、大鼠血清遞質(zhì)SP、5-HT、ET-1、NO含量的比較:SP:M3，和M2組比較(P＜0.01)，有顯著性差異，SP含量比M2少。M3，M4和M5比較(P＜0.01)，有顯著性差異，SP含量比M5組的少。5-HT:M3、M4和M2組比較(P＜0.01)，有顯著性差異，5-HT的含量比莫沙必利組的少;M5組和M2組比較，有顯著差異性，5-HT的含量比莫沙必利組的多;M3，M4組和M5組比較(P＜0.05)，有顯著性差異，5-HT的含量比莫沙

11、必利組的多。ET-1:M1和Z組，M2、M3、M4、M5組比較均有顯著性差異(P＜0.01)。M2組和M3組比較(P＜0.01)，有顯著性差異，M3組ET-1的含量低于M2組;M2組和M5組比較(P＜0.01)，有顯著性差異，M5組ET-1的含量高于M2組;M3組、M4組和M5組比較(P＜0.05)，有顯著性差異，M5組ET-1的含量高于M3組，M4組。NO:M3組和M2組比較(P＜0.01)，有顯著性差異，M3組NO的含量高于M2組的

12、含量。M5組和M2組比較(P＜0.01)，有顯著性差異，M5組NO的含量明顯低于M2組的含量。
　　(4)胃竇Ghrelin蛋白表達(dá):胃竇Ghrelin蛋白的表達(dá)所示正常對(duì)照組（Z組）和莫沙必利組(M2)的條帶顏色灰度相似，M3、M4、M1組的顏色均比Z和M2的淺，M5的顏色最深。
　　結(jié)論：
　　(1)疏肝和胃湯的正丁醇部位，乙酸乙酯部位，原液可以增加肝郁脾虛證功能性消化不良大鼠的體重以及長(zhǎng)推進(jìn)和胃排空作用，余液部位

13、幾乎沒(méi)有增加肝郁脾虛證功能性消化不良腸推進(jìn)胃排空的作用。而石油醚部位的幾乎沒(méi)有提取率，所以實(shí)驗(yàn)排除疏肝和胃湯的石油醚和余液部位提取物，初步篩選出治療肝郁脾虛證功能性消化不良的正丁醇、乙酸乙酯部位提取物為后續(xù)研究做準(zhǔn)備。
　　(2)根據(jù)疏肝和胃湯有效部位提取物的初步篩選，研究正丁醇部位提取物、乙酸乙酯部位提取物以及原液對(duì)肝郁脾虛證功能性消化不良SD大鼠體重，胃腸動(dòng)力，血清遞質(zhì)及蛋白的表達(dá)，篩選出正丁醇部位提取物為較優(yōu)的部位。