中華按蚊高分辨率染色體圖譜及物理圖譜的構建.pdf

1、中華按蚊(Anopheles sinensis Wiedemann，1828)屬于按蚊屬(Anopheles genus)按蚊亞屬(Anopheles subgenus)的赫坎按蚊種團(An.hyrcanus group)，是我國廣大平原地區(qū)傳播間日瘧原蟲(Plasmodium vivax)的重要媒介之一，也是馬來絲蟲病的重要傳播載體。在細胞遺傳學上，中華按蚊還是研究多線染色體(polytenechromosome)的模式昆蟲，高品質的

2、多線染色體多見于幼蟲的唾液腺中。前期發(fā)表的中華按蚊染色體圖譜多被應用于種團內近似種的鑒定以及作為不同地理區(qū)域蚊蟲生態(tài)習性和瘧疾傳播能力差異相關探討的遺傳基礎。但由于發(fā)表的染色體圖譜分辨率較低，未能體現出種下分類的優(yōu)勢。近年來，隨著國內外基因組測序工作的啟動，韓國品系和中國品系中華按蚊基因組數據的相繼發(fā)表，使得中華按蚊物理圖譜的構建也顯得愈加重要。
　　雷氏按蚊(An.Lesteri Baisas&Hu，1936)是中華按蚊的姊妹近

3、緣種，同屬于赫坎按蚊種團，形態(tài)上高度相似，而且常在同一區(qū)域范圍內滋生繁衍，這給傳統的形態(tài)學分類鑒定帶來了困難。雖然雷氏按蚊和中華按蚊形態(tài)特征相似，但這兩個蚊種在生態(tài)習性和瘧疾傳播能力方面卻存在著顯著差異。中華按蚊廣泛分布于我國除青海和新疆以外的廣大地區(qū)，而雷氏按蚊則主要局限在中國中部和東南部地區(qū)。雷氏按蚊的傳瘧能力顯著高于中華按蚊，凡有雷氏按蚊存在的地區(qū)瘧疾發(fā)病就高，往往造成局部暴發(fā)。
　　本研究論文中，我們制作完成了一副中華按蚊

4、高分辨率的唾液腺多線染色體圖譜，將其分為39個區(qū)、116個亞區(qū)。為了促進中華按蚊群體遺傳學的研究，我們描述了一個中華按蚊種內多態(tài)性倒位3Ra，并通過比較倒位純合子的染色體帶型差異，將倒位位點定位在染色體28A和31A亞區(qū)上。為了促進中華按蚊基因組的染色體定位和組裝，我們同時利用熒光原位雜交技術，將52個DNA探針定位到中華按蚊的染色體圖譜上，初步構建了第一副物理圖譜。最后，通過比較分析保守DNA探針在不同染色體上的分布，我們確定了中華按

5、蚊與岡比亞按蚊(An.gambiae)染色體進化關系。研究發(fā)現，中華按蚊和岡比亞按蚊間染色體臂2R和3R發(fā)生了互換，而其它染色體臂(X、2L和3L)同源性一致。中華按蚊染色體圖譜和物理圖譜的構建完成將為按蚊系統分類學、群體遺傳學、生態(tài)遺傳學和遺傳進化等的研究打下了堅實的基礎。
　　為了尋求鑒定中華按蚊和雷氏按蚊有效和必要的細胞遺傳學手段，以及闡明兩個蚊種間生態(tài)習性和瘧疾傳播能力差異的遺傳基礎，我們構建了一副雷氏按蚊高分辨率的多線染

6、色體圖譜，并根據中華按蚊的染色體圖譜，將其劃分為相應的39個區(qū)和116個亞區(qū)。同時利用熒光原位雜交技術，將24個保守的中華按探針定位于雷氏按蚊染色體上。通過對染色體帶型和DNA探針在兩個蚊種上的位置比較分析發(fā)現，中華按蚊和雷氏按蚊染色體帶型極為相似，且在進化上各條染色體臂高度同源。另外，我們對雷氏按蚊中發(fā)現的兩個種內多態(tài)性倒位2La和3Ra進行了描述，并將倒位位點確定在染色體圖譜上。本研究不但能提供有價值的細胞遺傳學鑒定資料，還能為進一