琯溪蜜柚單染色體AFLP指紋圖譜構(gòu)建和分類.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、柚(Citrusgrandis(L.)Osbeck)是柑橘屬真正柑橘類植物,是我國(guó)的特色果樹。由于具有生長(zhǎng)周期長(zhǎng)和遺傳背景較復(fù)雜等特點(diǎn),致使柚的精確物理圖譜一直難以構(gòu)建,這對(duì)其在基因組學(xué)、分子生物學(xué)等方面的深入研究造成了困難。
　　 本試驗(yàn)采用單染色體微分離與微克隆技術(shù),建立了48條柚單染色體文庫(kù);通過(guò)構(gòu)建AFLP指紋圖譜,利用Ntsys軟件進(jìn)行分析,完成對(duì)柚單染色體較為系統(tǒng)的分類。
　　 主要試驗(yàn)結(jié)果如下:1、摸索出適

2、合柚的基因組DNA提取方法,獲得質(zhì)量好、純度高的柚基因組DNA;采用玻璃針微分離法,分離得到48條單染色體。2、經(jīng)兩輪LA-PCR對(duì)柚單染色體進(jìn)行體外擴(kuò)增,建立了48條柚單染色體文庫(kù);從23對(duì)引物組合中篩選出較為理想的3對(duì),進(jìn)行單染色體的AFLP選擇性擴(kuò)增。
　　 3、采用變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)及銀染方法,獲得具有大量多態(tài)性片段的單染色體AFLP指紋圖譜。
　　 4、通過(guò)Ntsys軟件分析AFLP指紋圖譜,將

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