2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩75頁未讀 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、目的:將含重組質(zhì)粒pGEX-4T-2/melittin-<'88>ArgIL-2的大腸桿菌進行表達發(fā)酵條件的優(yōu)化,得到可溶性表達的重組蛋白;分離純化該重組蛋白,得到高純度的、足量的、具有生物學(xué)活性的蜂毒素與基因變構(gòu)IL-2(melittin-<'88>ArgIL-2)嵌合蛋白,探索建立該蛋白的純化工藝;研究此嵌合蛋白在體外增強免疫功能和抗腫瘤的生物學(xué)活性。 方法:將含重組質(zhì)粒的大腸桿菌DH5a,經(jīng)IPTG誘導(dǎo)進行高效表達,經(jīng)反

2、復(fù)實驗摸索表達出可溶性蛋白;經(jīng)過親和層析、凝血酶Thrombin酶切和離子交換層析進行純化,純化的重組melittin-<'88>ArgIL-2嵌合蛋白,經(jīng)SDS-PAGE電泳鑒定蛋白純度并進行定量;用液相測定法研究嵌合蛋白的抑菌活性,用MTT法研究嵌合蛋白對外周血單個核細胞PBMC增殖、NK細胞殺傷活性、人卵巢癌細胞SKOV<,3>和Hela細胞生長抑制的作用。 結(jié)果:在25℃和IPTG0.8mmol/L條件下,表達出了可溶

3、性蛋白;經(jīng)過一系列的分離純化步驟,純化后的重組melittin-<'88>ArgIL-2嵌合蛋白純度達95%,蛋白濃度大約200mg/L,建立了該嵌合蛋白的純化工藝;純化后的嵌合蛋白在體外能抑制金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的生長,能促進PBMC細胞增殖,能增強NK細胞的殺傷活性,能抑制人卵巢癌細胞SKOV3和Hela細胞的生長增殖。 結(jié)論:建立了melittin-<'88>ArgIL-2嵌合蛋白的純化工藝,該嵌合蛋白在體外具有一定

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論