沙棘籽蛋白對2型糖尿病模型小鼠體內(nèi)降血糖與炎癥因子的干預(yù)作用.pdf

1、沙棘（Hippohae rhamnoides L.）是一種天然的藥食同源性植物，屬于胡禿子科（Elaeagnaceae）沙棘屬（Hippophae），沙棘的根、莖、葉、花、果實(shí)均含有豐富的營養(yǎng)和生物活性物質(zhì)。此外，沙棘籽蛋白質(zhì)含量豐富，是一種很好的植物蛋白資源。沙棘資源廣泛分布于歐亞地區(qū)，我國是沙棘資源最豐富的國家，主要分布于西南、西北和華北等地。本文以沙棘籽為原料，采用石油醚脫脂、乙醇去黃酮與原花青素，堿提酸沉的方法制備沙棘籽蛋白，同

2、時(shí)研究了沙棘籽蛋白對糖尿病小鼠的降血糖作用、對炎癥因子的干預(yù)作用以及對相關(guān)基因表達(dá)的影響，并對其功效、機(jī)制進(jìn)行了探索，為沙棘籽蛋白產(chǎn)品的開發(fā)利用提供理論依據(jù)。
　　本研究以沙棘籽為原料制備沙棘籽蛋白，蛋白質(zhì)全自動(dòng)測定儀測定沙棘籽蛋白含量及其得率。氨基酸全自動(dòng)分析儀測定沙棘籽蛋白氨基酸成分。利用高脂飲食結(jié)合化學(xué)試劑誘導(dǎo)得到2型糖尿病小鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，以沙棘籽蛋白、沙棘多糖和沙棘原花青素進(jìn)行灌胃處理4周，研究其對糖尿病小鼠體重(BW)、空

3、腹血糖(FBG)、血脂、血清胰島素(SIN)的影響以及對糖尿病小鼠胰島素抵抗的改善作用;用酶聯(lián)免疫雙抗體夾心法檢測小鼠血清C反應(yīng)蛋白（CRP）、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、核因子-κB(NF-κB)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)水平，檢測小鼠肝臟AMP激活的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase，AMPK)、沉默信息調(diào)節(jié)因子1(Silent information regulator1，Sirt1)活性;用

4、半定量RT-PCR(sqRT-PCR)的方法研究沙棘籽蛋白對糖尿病小鼠肝臟葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase，G-6-P)、糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β，GSK-3β)、肉堿棕櫚?；D(zhuǎn)移酶-1(carnitine palmitoyl transferase1-α，CPT1-α)、糖原磷酸化酶(glycogenphosphorylase，GP)基因表達(dá)的影響。

5、r>　　結(jié)果顯示，采用堿提酸沉的方法制備沙棘籽蛋白的含量為70.1％，總提取率為36.5％，氨基酸種類齊全，必需氨基酸組成比例均勻。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，沙棘籽蛋白、沙棘多糖和沙棘原花青素處理組小鼠空腹血糖、總甘油三脂(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)均顯著低于模型組(p＜0.05)，高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、胰島素敏感指數(shù)顯著高于模型組(p＜0.05)，血清胰島素水平和胰島素抵抗指數(shù)（IRI）顯著低于模型

6、組(p＜0.05);沙棘籽蛋白、沙棘多糖和沙棘原花青素處理組小鼠血清炎癥因子水平均顯著低于模型組(p＜0.05)，小鼠肝臟AMPK、Sirt1活性均顯著高于模型組(p＜0.05)。各組小鼠RT-PCR結(jié)果顯示，沙棘籽蛋白、沙棘多糖和沙棘原花青素各劑量組G-6-P、GSK-3β、CPT1-α和GPmRNA表達(dá)水平均低于模型組。
　　本研究結(jié)果表明，沙棘籽蛋白具有降低2型糖尿病小鼠的體重的功效，具有改善小鼠高血脂和高血糖癥狀的功效。E