蛇石足杉內(nèi)生真菌Slf-14及藜蒿中黃酮苷類化學成分研究.pdf

1、蛇足石杉(Huperziaserrata),又名救命王、千層塔、蛇足草,屬石松目石杉科石杉屬多年生草本蕨類植物,是一種傳統(tǒng)中草藥。其植物組織內(nèi)存在大內(nèi)生真菌。研究表明,內(nèi)生真菌Slf-14發(fā)酵培養(yǎng)能產(chǎn)生石杉堿甲等生物堿化學成分,對乙酰膽堿酶具有可逆,高效,高選擇性的抑制活性,其發(fā)酵培養(yǎng)條件:培養(yǎng)基為PD培養(yǎng)基,培養(yǎng)量為150mL,培養(yǎng)溫度為28℃,培養(yǎng)速率為120r/min。發(fā)酵培養(yǎng)產(chǎn)生菌絲體和發(fā)酵液,分別用石油醚、氯仿與乙酸乙酯依次萃

2、取,得到石油醚萃取部分、氯仿萃取部分與乙酸乙酯萃取部分,以硫代乙酰膽堿(ATCh)為底物,5,5-二硫代-2-硝基苯甲酸(DTNB)為顯色劑,通過DTNB顯色法檢測其菌絲體與發(fā)酵液不同萃取部分乙酰膽堿酯酶抑制活性。結(jié)果表明菌絲體氯仿萃取部分抑制活性最高。采用紫外分光光度法,以氯仿為參比,檢測波長為313nm,測定內(nèi)生真菌Slf-14菌絲體中總生物堿含量。
　　 為進一步闡明內(nèi)生真菌Slf-14菌絲體乙酰膽堿酯酶抑制活性的物質(zhì)基礎(chǔ)

3、和作用機理,本研究采用乙醇提取,分布多次萃取和反相硅膠柱層析等多種柱層析法對菌絲體氯仿萃取部分進行多次分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定研究,得到其中的主要化學成分。
　　 本研究首次對內(nèi)生真菌Slf-14發(fā)酵產(chǎn)生的菌絲體與發(fā)酵液的不同萃取部分對乙酰膽堿酶的抑制活性進行篩選與研究,確定了菌絲體萃取部分的乙酰膽堿酶抑制活性最高,并對其進行分離純化與初步化學成分研究,為具體闡明乙酰膽堿酶抑制活性的物質(zhì)基礎(chǔ)與作用機理提供了初步理論依據(jù)。
　　

4、 藜蒿(ArtemisiaselengensisTurcz)學名蔞蒿,是菊科蒿屬多年生草本植物,其植物組織內(nèi)含有大量的黃酮類物質(zhì),具有降低心肌耗氧量、使冠脈和腦血管流量增加、降血糖和血脂等作用及具有清除人體中超氧離子自由基、抗衰老、增強機體免疫力等生理活性。為了進一步闡明藜蒿中所含黃酮苷類化合物的化學結(jié)構(gòu),對鄱陽湖野生藜蒿中黃酮苷類化合物進行分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定研究,采用超聲波輔助溶劑提取法提取藜蒿中的化學成分,并通過聚酰胺柱層析法分離藜

5、蒿中的黃酮苷元與黃酮苷類化合物以及采用SephadexLH-20葡聚糖凝膠柱色譜法分離純化藜蒿中的黃酮苷類單體化合物,根據(jù)化合物的理化性質(zhì)和波譜特征鑒定化合物的化學結(jié)構(gòu)。研究表明,藜蒿提取物中的黃酮苷元和黃酮苷類化合物得到較好的分離,同時分離并鑒定了兩個黃酮苷類的單體化合物,分別為柯依利素.7-O-β-D-葡萄糖苷和槲皮素-3-O-β-D-木糖苷。
　　 本實驗采用超聲波輔助溶劑提取并結(jié)合聚酰胺柱層析可以充分提取并有效分離藜蒿提