NFAT調控基因在他克莫司藥效學監(jiān)測中的意義.pdf

1、目的:建立測定人血漿中NFATc1、IL-2、IFN-γ、GM-CSF mRNA表達情況的反轉錄酶-聚合酶鏈反應法（Real-time qPCR）;通過實驗分析腎移植術后患者發(fā)生急性排斥與感染時體內NFATc1、IL-2、IFN-γ、GM-CSF mRNA的表達情況與經過治療使患者的急性排斥或感染得到逆轉且恢復正常體征時，其體內NFATc1、IL-2、IFN-γ、GM-CSF mRNA的表達情況，并與他克莫司(TAC)血藥濃度聯(lián)合考察，

2、建立他克莫司藥效學監(jiān)測方法。
　　方法:
　　1.他克莫司藥效學監(jiān)測方法的建立：采用Real-time qPCR法，收集腎移植術后患者的血漿，進行NFATc1、IL-2、IFN-γ、GM-CSF mRNA的檢測。
　　2. NFAT調控基因在發(fā)生急性排斥的腎移植患者中的檢測：將經病理證實的T細胞介導的急性排斥的20例腎移植患者納入研究中?；颊呒{入研究組后的第1天，早晨服藥前空腹采血3 mL，供檢測患者NFATc1、IL

3、-2、IFN-γ、GM-CSF mRNA使用。當入組病人的急性排斥發(fā)生逆轉，臨床觀察指標均恢復正常值后，于臨床診斷患者的急性排斥消失后的第1天，患者早晨服藥前空腹采血3 mL進行同樣的檢測。
　　3. NFAT調控基因在發(fā)生感染的腎移植患者中的檢測：將檢驗科檢測為細菌感染的20例腎移植患者納入研究中?；颊呒{入研究組后的第1天，早晨服藥前空腹采血3 mL，供檢測患者NFATc1、IL-2、IFN-γ、GM-CSF mRNA使用。當入

4、組病人的細菌感染消失后，于檢驗科檢測患者的細菌感染消失后的第1天，患者早晨服藥前空腹采血3 mL進行同樣的檢測。
　　4.腎移植患者中他克莫司血藥濃度與藥效學相關性研究：20例腎移植術后發(fā)生急性排斥與20例腎移植術后發(fā)生細菌感染的腎移植患者，檢測其發(fā)生急性排斥和細菌感染及兩種反應現(xiàn)象消失時患者體內NFATc1、IL-2、IFN-γ、GM-CSF mRNA的表達情況的變化，以及其與他克莫司血藥濃度之間的關系。
　　結果:

5、>　　1. NFAT調控基因的表達情況的測定可以用于TAC藥效學監(jiān)測，該方法具有快速、簡單、靈敏度高等特點，可以滿足TAC藥效學監(jiān)測需求。
　　2.排斥組入選的20例腎移植患者，經血漿NFAT調控基因mRNA檢測，其具體表達情況從數(shù)據(jù)中可以看出，排斥組腎移植患者在接受治療，排斥反應消天津醫(yī)科大學碩士學位論文
　　失后，其血漿中NFATc1、IL-2、IFN-γ、GM-CSF mRNA的表達值均較治療前有顯著性的降低，差異具有

6、統(tǒng)計學意義（P<0.05）。數(shù)據(jù)結果表明，NFATc1 mRNA檢測的顯著性差異最大。
　　3．感染組腎移植患者在接受治療細菌感染消失后，其血漿中NFATc1、IL-2、IFN-γ、GM-CSF mRNA的表達值均較治療前有顯著性的增高，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。數(shù)據(jù)結果表明，GM-CSF mRNA的顯著性差異最大。
　　4．根據(jù)血藥濃度測定結果統(tǒng)計，排斥組患者治療前后的C0分別為4.44±1.89和6.81±2.

7、63，P=0.002,具有統(tǒng)計學差異，排斥組患者TAC與NFAT調控基因之間并無顯著的相關性（P＞0.05）。感染組患者治療前后的C0分別為8.60±3.79和4.62±1.86，P<0.001，具有統(tǒng)計學差異，感染組患者TAC與NFAT調控基因之間并無顯著的相關性（P＞0.05）。
　　結論：
　　1.本研究中建立的Real-time qPCR法簡單、快速、靈敏。對20例腎移植術后發(fā)生急性排斥的患者的檢測結果表明，腎移植術

8、后患者其血漿中NFAT調控基因表達值的異常升高與患者發(fā)生急性排斥密切相關，本研究初步為NFAT調控基因作為一種新型的鈣調磷酸酶抑制劑藥效學指標提供了參考依據(jù)。
　　2．腎移植術后患者其血漿中NFAT調控基因表達值的異常降低與患者發(fā)生細菌感染密切相關，患者血漿中NFAT調控基因表達值的檢測有助于對患者機體免疫狀態(tài)進行監(jiān)測。
　　3．監(jiān)測腎移植術后患者其體內NFAT調控基因表達情況能預示腎移植術后急性排斥或細菌感染，對治療效果的