小鼠巢蛋白基因在神經(jīng)發(fā)育中的表達(dá)調(diào)控.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩80頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、中等纖維蛋白是細(xì)胞骨架的一種主要組成成分,并在許多組織的發(fā)育過程中交替表達(dá)和重新組裝。巢蛋白(Nestin)屬第六類中等纖維蛋白,在神經(jīng)和肌肉的發(fā)育過程中瞬時(shí)表達(dá)。利用小鼠P19胚胎性癌細(xì)胞(Embryonal carcinoma,EC),我們?cè)敿?xì)分析了小鼠Nestin基因5’上游區(qū)的啟動(dòng)子序列。該基因具有三個(gè)轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn),核心啟動(dòng)子中兩個(gè)相鄰的Sp1結(jié)合位點(diǎn)為啟動(dòng)子活性必需,并且轉(zhuǎn)錄因子Spl和Sp3特異性結(jié)合于兩Sp1位點(diǎn)。此外,過

2、表達(dá)顯性失活的Sp1和Sp3顯著抑制了Nestin基因啟動(dòng)子的活性。以上結(jié)果表明通用轉(zhuǎn)錄因子Sp1和Sp3維持了Nestin基因的基礎(chǔ)表達(dá)。 Nestin基因的第二內(nèi)含子具有中樞神經(jīng)系統(tǒng)(Central nervous system,CNS)組織特異性增強(qiáng)子活性,然而負(fù)責(zé)調(diào)控該基因在神經(jīng)發(fā)育過程中表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子尚不明確。利用視黃酸(Retinoic acid,RA)誘導(dǎo)的P19細(xì)胞體外神經(jīng)分化模型,我們發(fā)現(xiàn)小鼠Nestin基因在

3、神經(jīng)分化過程中表達(dá)瞬時(shí)上調(diào),這一表達(dá)變化受到位于該基因第二內(nèi)含子中組織特異性增強(qiáng)子的調(diào)控。詳細(xì)分析第二內(nèi)含子中3’端320 bp的核心增強(qiáng)子后發(fā)現(xiàn),該增強(qiáng)子的活性在未誘導(dǎo)的P19EC細(xì)胞中主要依賴于POU、HRE/RXR/TTF1和SF1位點(diǎn),而在P19神經(jīng)前體細(xì)胞中主要依賴于Sox、POU和HRE/RXR/TTF1位點(diǎn)。雞胚電轉(zhuǎn)和轉(zhuǎn)基因小鼠實(shí)驗(yàn)均證實(shí)了小鼠Nestin基因第二內(nèi)含子及其核心序列能指導(dǎo)報(bào)告基因在胚胎發(fā)育中的CNS特異表達(dá)

4、,其中Sox、POU、HRE/RXR/TTF1等位點(diǎn)為該基因在雞胚神經(jīng)管(H.H.Stage17)中表達(dá)必需,而SF1位點(diǎn)為該基因在初期神經(jīng)管(H.H.Stage 10)中表達(dá)必需。值得注意的是,通過對(duì)相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)及凝膠阻滯分析,結(jié)果提示在P19細(xì)胞神經(jīng)分化不同時(shí)期,POU家族的不同成員通過POU因子結(jié)合位點(diǎn)調(diào)控了Nestin的表達(dá),即在未誘導(dǎo)的P19EC細(xì)胞中,Oct1和Oct4結(jié)合于POU位點(diǎn),而在P19神經(jīng)前體細(xì)胞中,Brn

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論