異色瓢蟲卵子發(fā)生及飼料對其卵黃發(fā)生的影響.pdf

1、異色瓢蟲(HarmoniaaxyridisPallas)隸屬于鞘翅目(Coleoptera),瓢蟲科(Coccinellidae)是多種蚜蟲、粉虱、螨、鱗翅目昆蟲卵和低齡幼蟲以及介殼蟲等害蟲的主要捕食性天敵,并具有捕食量大、壽命長、繁殖力強(qiáng)等特點(diǎn),是一種具備開發(fā)潛力的天敵昆蟲。本文對異色瓢蟲的雌性生殖系統(tǒng)、卵子發(fā)生過程進(jìn)行了觀察,研究了不同飼料對異色瓢蟲生長發(fā)育和繁殖,以及卵黃發(fā)生的影響,并對其影響生殖的原因進(jìn)行了分析。以揭示異色瓢蟲卵

2、形成過程,并為替代飼料的尋找和提高人工飼料飼養(yǎng)異色瓢蟲的生殖力提供參考和依據(jù)。主要結(jié)果如下:
　　 1.觀察了異色瓢蟲雌性內(nèi)生殖系統(tǒng),并根據(jù)卵室的有無和卵黃沉積情況將初羽化至卵發(fā)育成熟的卵巢劃分為4個(gè)等級(jí)。采用石蠟切片的方法對異色瓢蟲卵子發(fā)生過程進(jìn)行觀察,根據(jù)卵母細(xì)胞所在位置、體積和細(xì)胞核的變化,滋養(yǎng)細(xì)胞和濾泡細(xì)胞的形態(tài)變化,以及卵黃沉積沉積情況,將異色瓢蟲卵子發(fā)生劃分為卵母細(xì)胞分化期、卵母細(xì)胞營養(yǎng)期和卵黃形成期3個(gè)時(shí)期,并進(jìn)一

3、步將其分為7個(gè)階段。
　　 2.用蒸餾水沉淀法對異色瓢蟲卵內(nèi)主要蛋白一一卵黃蛋白進(jìn)行了純化,通過Native-PAGE和SDS-PAGE分析,表明異色瓢蟲卵黃蛋白為糖脂復(fù)合蛋白,其天然蛋白分子量為625.9kDa。由4個(gè)亞基構(gòu)成,亞基分子量分別為154.6kDa、133.2kDa、44.1kDa.和40.0kDa,分為大、小兩種。對其氨基酸組成和含量分析發(fā)現(xiàn),在所測氨基酸種類中,以谷氨酸和脯氨酸的含量較高,分別為11.32％和1

4、0.83%。已見報(bào)道的,昆蟲體內(nèi)所必需的10種氨基酸占總量的41.47%,其中以賴氨酸和纈氨酸含量較高,分別為6.93%和6.94%。
　　 3.用以豬肝為主體的9種人工飼料、冷藏和冷凍麥蛾卵并以桃蚜為對照飼養(yǎng)異色瓢蟲,結(jié)果表明,麥蛾卵能夠滿足異色瓢蟲幼蟲生長發(fā)育的需要,并且冷凍麥蛾卵的飼喂效果明顯好于冷藏麥蛾卵。冷凍麥蛾卵飼喂異色瓢蟲,其幼蟲發(fā)育歷期為10.9d,成蟲獲得率高達(dá)91.0%,與對照(10.4天和72.8%)差異不

5、顯著。但羽化雌蟲10.0%不能產(chǎn)卵,產(chǎn)卵前期平均為18.2天,顯著長于對照組(8.1天);單雌產(chǎn)卵量424.7粒,僅為對照組(938.4粒)的1/2。冷凍麥蛾卵可以作為異色瓢蟲幼蟲期的替代飼料,當(dāng)成蟲期蚜蟲不足時(shí)亦可以作為補(bǔ)充飼料,但是不宜全程飼喂。9種人工飼料飼養(yǎng)異色瓢蟲仍存在很多不足,會(huì)導(dǎo)致其幼蟲歷期延長、死亡率高、成蟲生殖力下降、卵孵化率低等。其中,以豬肝、蜂蜜、蔗糖、昆蟲維生素、酵母抽提物和橄欖油配制的飼料,成蟲獲得率較高為43

6、.7%,但其中17.6%的雌蟲不能產(chǎn)卵,單雌平均產(chǎn)卵量僅為231.3粒。
　　 4.以異色瓢蟲的卵黃蛋白作為抗原,制備抗卵黃蛋白的多克隆抗體,建立卵黃蛋白測定方法,研究桃蚜和冷凍麥蛾卵對異色瓢蟲卵黃發(fā)生的影響。結(jié)果表明異色瓢蟲與大多數(shù)昆蟲相同,其卵黃蛋白前體主要在脂肪體中合成,并通過血淋巴輸送至卵巢。冷凍麥蛾卵飼喂的異色瓢蟲脂肪體中卵黃蛋白始終保持在低水平,進(jìn)而影響卵巢中卵黃蛋白的沉積;總蛋白含量分析表明,兩處理間初羽化雌蟲脂肪

7、中的總蛋白含量差異較小,隨瓢蟲發(fā)育,對照組總蛋白含量波動(dòng)較大,卵黃蛋白亦隨總蛋白含量發(fā)生變化;而麥蛾卵組瓢蟲脂肪中的總蛋白含量始終保持在較高水平,但卵黃蛋白合成量明顯低于對照。
　　 5.分別以液質(zhì)和氣質(zhì)聯(lián)用測定兩種飼料間,以及其所飼喂的初羽化和產(chǎn)卵雌蟲間的氨基酸和脂肪酸組成差異。結(jié)果表明,桃蚜所含氨基酸含量為2718.7nmol/mg約為麥蛾卵(1431.8nmol/mg)的兩倍,但兩飼料氨基酸相對組成相似;而麥蛾卵中總脂肪酸

8、含量為77.31μg/mg較桃蚜(31.4μg/mg)明顯偏高,并且組成不同,桃蚜中肉豆蔻酸和棕櫚酸分別占總含量的58.4%和18.7%,而麥蛾卵中則為油酸、亞油酸和棕櫚酸含量較高,分別為54.0%、14.1%和13.7%。兩飼料所飼喂的初羽化和產(chǎn)卵雌蟲體內(nèi)氨基酸組成均基本一致,可見氨基酸含量和組成并非麥蛾卵影響異色瓢蟲生殖力的原因;兩者脂肪酸組成均以硬脂酸、油酸和亞油酸含量較高。但肉豆蔻酸含量差異顯著,桃蚜飼喂瓢蟲初羽化和初產(chǎn)卵期體內(nèi)