中華鱉卵子發(fā)生與卵黃形成的細(xì)胞學(xué)研究.pdf

1、動(dòng)物卵子的發(fā)生是發(fā)育生物學(xué)中重要的問(wèn)題之一，而卵黃的形成是卵子發(fā)生中能量的吸收和儲(chǔ)備過(guò)程。因此，動(dòng)物卵細(xì)胞和卵黃發(fā)生的超微結(jié)構(gòu)研究受到許多學(xué)者的重視。中華鱉(Pelodiseus Sinensis)屬于爬行綱龜鱉目，是我國(guó)爬行動(dòng)物的代表動(dòng)物之一，其進(jìn)化地位比較特殊。迄今有關(guān)中華鱉的生態(tài)調(diào)查，人工育苗方面的研究已有過(guò)相關(guān)報(bào)道，但作為個(gè)體發(fā)育重要環(huán)節(jié)之一的卵子發(fā)生及卵黃發(fā)生途徑等方面卻少有報(bào)道。為彌補(bǔ)這方面資料的不足，本文的研究目的在于了解

2、中華鱉卵巢的顯微和超微結(jié)構(gòu)變化，試圖為中華鱉卵子發(fā)生等方面的研究提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，以及確定中華鱉在爬行動(dòng)物乃至脊椎動(dòng)物中的進(jìn)化地位。
　　 試驗(yàn)Ⅰ中華鱉卵巢結(jié)構(gòu)及卵子發(fā)生過(guò)程的研究應(yīng)用組織學(xué)方法觀察了中華鱉(Pelodiseus Sinensis)卵巢與卵子的動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)變化，以期探究卵子發(fā)生與卵黃形成的形態(tài)學(xué)特征。結(jié)果顯示，中華鱉卵巢實(shí)質(zhì)由周?chē)べ|(zhì)和中央髓質(zhì)構(gòu)成。皮質(zhì)中各個(gè)發(fā)育階段的卵泡、閉鎖卵泡以及黃體等相間分布。較大的卵泡以卵

3、巢柄懸掛在系膜上。卵泡由中央的卵母細(xì)胞和周?chē)膯螌訛V泡細(xì)胞組成，外周有卵泡鞘包圍。皮質(zhì)局部區(qū)域可見(jiàn)生殖圃分布。根據(jù)中華鱉卵黃形成特點(diǎn)將其卵子發(fā)生過(guò)程分為卵黃發(fā)生前期和卵黃發(fā)生期，又根據(jù)濾泡細(xì)胞以及透明帶等結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)將卵子發(fā)生細(xì)分為10個(gè)連續(xù)的時(shí)期。Ⅰ到Ⅲ期的卵細(xì)胞核內(nèi)有明顯的燈刷染色體以及外周核，核一側(cè)有卵黃核存在，隨后卵黃核逐漸消失。第Ⅵ期到第X期是卵黃小板逐漸形成的階段。起初卵黃顆粒被一個(gè)小囊泡包裹，隨著卵黃的發(fā)生，小囊泡中包含越來(lái)

4、越多的卵黃小球，數(shù)量和大小都在空泡中不斷增加，逐漸融合成卵黃小板，卵黃小板的體積隨著卵子的發(fā)生也逐漸增大。中華鱉卵巢的腔隙系統(tǒng)很發(fā)達(dá)，它們連同平滑肌纖維一起包圍在各個(gè)發(fā)育階段的卵泡周?chē)Ｇ幌秲?nèi)含物有三種物質(zhì)結(jié)構(gòu)：顆粒狀、纖維狀以及透明膠質(zhì)狀。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，中華鱉卵子發(fā)生過(guò)程與鱷類和鳥(niǎo)類基本相似，而與爬行類中的蜥蜴和蛇類存在一定差異，與哺乳類差別則更為明顯。這一結(jié)果為新近提出的把龜鱉類作為鱷和鳥(niǎo)支系的姐妹群，而不是現(xiàn)生爬行類中最基部的一支

5、這一理論提供了形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)，同時(shí)亦為動(dòng)物進(jìn)化研究提供一定理論依據(jù)。
　　 試驗(yàn)Ⅱ中華鱉卵巢超微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及卵黃發(fā)生途徑的研究所有脊椎動(dòng)物的卵巢生長(zhǎng)期的卵母細(xì)胞及其周?chē)臑V泡細(xì)胞都有極其相似的功能聯(lián)系。通過(guò)對(duì)中華鱉卵巢卵泡電鏡的觀察發(fā)現(xiàn)，處于生長(zhǎng)期較早階段的卵細(xì)胞胞質(zhì)靠近卵膜處有大量線粒體存在，并可以觀察到部分線粒體逐漸轉(zhuǎn)變成卵黃顆粒的過(guò)程。而濾泡細(xì)胞內(nèi)用于合成卵黃前體物質(zhì)的各種細(xì)胞器均少有見(jiàn)到。透明帶有促進(jìn)卵黃物質(zhì)運(yùn)輸?shù)墓δ?，它由?/p>

6、細(xì)胞和濾泡細(xì)胞向外伸出的指狀突起交錯(cuò)形成，且排列整齊緊密。根據(jù)以上結(jié)果我們推斷在此階段卵黃物質(zhì)主要依靠卵母細(xì)胞自身合成，即卵黃的形成途徑以內(nèi)源性為主。到了卵母細(xì)胞生長(zhǎng)期的較晚階段，一部分卵黃前體物質(zhì)在其他器官合成并通過(guò)濾泡細(xì)胞到達(dá)卵母細(xì)胞胞質(zhì)中，但在某些情況下卵黃前體物質(zhì)也會(huì)通過(guò)濾泡細(xì)胞間隙進(jìn)入卵母細(xì)胞。濾泡細(xì)胞也會(huì)利用自身胞質(zhì)加工卵黃前體物質(zhì)并最終運(yùn)輸至卵細(xì)胞內(nèi)。電鏡觀察結(jié)果還顯示，卵黃發(fā)生后期透明帶松散無(wú)規(guī)則，濾泡細(xì)胞向外凸出的微絨

7、變得稀少，卵母細(xì)胞上的微絨毛內(nèi)有卵黃前體顆粒出現(xiàn)。此外，在靠近濾泡細(xì)胞處有橫向的絲狀物質(zhì)分布。從以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果我們可以推斷中華鱉卵黃物質(zhì)的發(fā)生是內(nèi)源性和外源性途徑共同作用的結(jié)果，到了晚期階段外源性途徑的作用明顯加強(qiáng)以補(bǔ)充卵細(xì)胞自身胞質(zhì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不足，滿足卵細(xì)胞在排卵前迅速增長(zhǎng)的需要。
　　 試驗(yàn)Ⅲ中華鱉卵巢的細(xì)胞化學(xué)研究應(yīng)用雄激素受體（androgen receptor, AR）和雌激素受體（estrogen receptor,