三氧化二砷對(duì)實(shí)驗(yàn)性小鼠支氣管哮喘氣道重塑的影響及機(jī)制的研究.pdf

1、支氣管哮喘是一種全球性疾病，無(wú)地域和種族的局限性，也無(wú)年齡和性別的明顯差異。哮喘是以氣道阻塞，支氣管炎癥以及氣道重塑為特征。呼吸道重塑過(guò)程中基底膜與平滑肌增厚是哮喘不易根治的重要原因，故預(yù)防和逆轉(zhuǎn)哮喘的氣道重建具有重要意義。據(jù)中醫(yī)古籍記載，三氧化二砷具有根治哮喘的奇效。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)有少量關(guān)于三氧化二砷治療哮喘的相關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究，主要集中于誘導(dǎo)炎癥細(xì)胞凋亡方面，對(duì)于慢性哮喘氣道重塑的干預(yù)尚無(wú)相關(guān)報(bào)道。
　　 目的：
　　

2、探討預(yù)防和治療支氣管哮喘氣道重塑的新途徑。
　　 方法：
　　 1、建立動(dòng)物模型:建立哮喘氣道重塑的小鼠動(dòng)物模型，將40只成熟雌性清潔級(jí)BABL/c小鼠隨機(jī)分為健康對(duì)照(A)組、哮喘模型(B)組、地塞米松干預(yù)(C)組和三氧化二砷干預(yù)(D)組，于0、7、14天A組小鼠腹腔注射生理鹽水，B、C、D組小鼠腹腔注射卵清蛋白(OVA)和氫氧化鋁凝膠混懸液共3次，致敏1周后開始A組用生理鹽水霧化激發(fā)，B、C、D組以1％的OVA霧化激

3、發(fā)，每天霧化30分鐘，每周2次，持續(xù)8周，藥物干預(yù)組每次霧化前分別予以地塞米松2mg/Kg和三氧化二砷(As2O3)4mg/Kg腹腔注射;
　　 2、模型最后一次激發(fā)后24 h內(nèi)測(cè)定肺功能指標(biāo)(氣道阻力RL和肺動(dòng)態(tài)順應(yīng)性Cdyn)，然后處死小鼠，采集動(dòng)物支氣管、肺組織;應(yīng)用HE染色，觀察支氣管、肺組織的病理形態(tài)改變，應(yīng)用圖象分析系統(tǒng)測(cè)定氣道內(nèi)周長(zhǎng)(Pi)、氣道管壁總面積(WAt)、氣道壁平滑肌面積(WAm)，支氣管平滑肌細(xì)胞核數(shù)

4、(N)，將測(cè)得的WAt、WAm、N用Pi進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，分別以WAt/Pi、WAm/Pi、N/Pi表示;
　　 3、應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)各組肺組織中的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)的蛋白表達(dá);應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)法檢測(cè)各組肺組織中的TGF-β1mRNA、VEGFmRNA、MMP-9mRNA表達(dá)水平。
　　 結(jié)果：
　　 致敏小鼠經(jīng)過(guò)

5、8周過(guò)敏原激發(fā)后，哮喘組小鼠在組織病理學(xué)、肺功能和病理形態(tài)學(xué)方面發(fā)生了較典型的慢性哮喘樣改變;激素組和三氧化二砷組小鼠的肺功能指標(biāo)及肺部改變介于慢性哮喘組和正常對(duì)照組之間;激素組和三氧化二砷組之間無(wú)顯著差異。
　　 哮喘組小鼠肺組織中TGF-β1、VEGF、MMP-9的蛋白和TGF-β1mRNA、VEGFmRNA、MMP-9mRNA的表達(dá)增強(qiáng)。與哮喘組相比，激素組和三氧化二砷組肺組織中TGF-β1、 VEGF、MMP-9的蛋白和

6、TGF-β1mRNA、VEGFmRNA、MMP-9mRNA的表達(dá)減弱，但仍強(qiáng)于正常對(duì)照組.
　　 結(jié)論：
　　 致敏后給予8周過(guò)敏原激發(fā)可以制造出哮喘氣道重塑模型;哮喘組小鼠肺組織中TGF-β1、VEGF、MMP-9表達(dá)均明顯增強(qiáng)，提示其均參與慢性哮喘氣道重塑的形成過(guò)程;而三氧化二砷組和激素組TGF-β1、VEGF、MMP-9表達(dá)均明顯減弱，小鼠哮喘氣道重塑亦明顯減輕，提示激素和三氧化二砷均可抑制慢性哮喘的氣道重塑過(guò)程，